【精品论文】肉类食品中亚盐检测研究[专业：应用化学]

河南工业大学硕士学位论文

肉类食品中亚盐检测研究

姓名：***申请学位级别：硕士专业：应用化学指导教师：展海军

20070501

知识水坝论文

摘要亚根是广泛存在于环境中的一种有害物质，尤其作为肉类食品加工中的防腐剂和发色剂应用广泛，迫切需要建立快速、灵敏、高效的痕量亚根的分析测试方法。本文应用电化学分析法和试纸法分别研究了食品中亚根的测定方法：ｌ、导数伏安法：根据室温下亚根在硫酸介质中强烈催化溴酸钾氧化甲基橙的反应，研究了甲基橙在悬汞电极上的电化学行为，结果发现甲基橙在氨性缓冲溶液中具有良好的二阶导数电流峰，峰电位为Ｅ＝一Ｏ．５４Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ）。通过导数线性伏安法跟踪催化反应过程中甲基橙浓度的变化，建立了测定痕量亚根的新方法。方法检测限可达１．０５ｘ１０击扎，线性范围２．３ｘ１０＂６～５．３ｘ１０４９／Ｌ。该法用于肉制品中亚根的检测，效果满意。２、试纸法：选用普通慢速定性滤纸为试纸材料，以磷酸酸化试纸，对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺和８一羟基喹啉复合体系作为显色剂制备亚根试纸；显色试纸经扫描仪成像，通过色度分析法进行试纸制备试验的条件优化，制备了新型亚根试纸，可定性定量快速测定食品中亚根。该方法灵敏快速，适用于现场检测。关键词：亚根，导数伏安法，甲基橙，悬汞电极，亚根试纸，色度分析ＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅｎｉｔｒｉｔｅ，８．８ａｋｉｎｄｏｆｄｅｌｅｔｅｒｉｏｕｓｓｕｂｓｔａｎｃｅ，ｗｉｄｅｌｙｅｘｉｓｔｓｉｎｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．Ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｉｎａｓｔｈｅｍｅａｔｆｏｏｄｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，ｔｈｅｎｉｔｒｉｔｅｉｓａｐｐｌｉｅｄｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙａｓｅｐｔｉｃａｎｄｃｏｌｏｒｆｏｒｍｅｒ．Ｉｔｂｅｃｏｍｅｓｍｏｒｅａｎｄｍｏｒｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｔｏｄｅｖｅｌｏｐｒａｐｉｄ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｈｉ【ｇｈｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｎａｌｙｔｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅｎｉｔｒｉｔｅ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｒｅｐｏｒｔｓｔｗｏｎｅｗｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅｎｉｔｒｉｔｅｕｓｉｎｇｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｎｉｔｒｉｔｅｐａｐｅｒ：１．ＤｅｒｉｖａｔｉｖｅｖｏｌｔａｍｍｅｔｅｒＩｎｅｆｆｅｃｔｉｎａｄｉｌｕｔｅｓｕｌｆｕｒｉｃａｃｉｄｍｅｄｉｕｍ，ｔｒａｃｅａｍｏｕｎｔｓｏｆｎｉｔｒｉｔｅｉｏｎｓｈｏｗｅｄｔｈｅｏｘｉｄａｔｉｏｎｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｍｅｔｈｙｌｂｕｆｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｍｅｔｈｙｌａｓｔｒｏｎｇｃａｔａｌｙｔｉｃｏｎｏｒａｎｇｅａｎｄｐｏｔａｓｓｉｕｍｂｒｏｍａｔｅ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｇａｖｅａａｎａｍｍｏｎｉａｃａｌｏｒａｎｇｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｖｏｌｔａｉｃｐｅａｋａｔＥ＝一Ｏ．５４Ｖ（ｖｓ．ＳｅＥ）ｗｈｅｎｗｅｓｅｌｅｃｔｈａｎｇｉｎｇｍｅｒｃｕｒｙｅｌｅｃｔｒｏｄｅ勰ｗｏｒｋｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｄｅ．ＴｈｅｋｉｎｅｔｉｃｖｏｌｔａｍｍｅｔｒｙｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆｔｒａｃｅｗａｓｂａｓｅｄｏｎａｍｏｕｎｔｏｆＮ０２一ｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｗｈｉｃｈｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆｍｅｔｈｙｌｏｒａｎｇｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃａｔａｌｙｔｉｃｒｅａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔａｎｄｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆＮ０２一ａｒｅ１．０５×１０击ｇ／Ｌａｎｄ２．３ｘ１０。６～５．３ｘ１０－４ｅｌＬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＳａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙｒｅｓｕｌｔｓＷｅｌ－ｅｏｂｔａｉｎｅｄｉｎｍｅａｔ．２．ＮｉｔｒｉｔｅｉｎｄｉｃａｔｏｒｐａｐｅｒｉｎｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｏｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅＳｅｌｅｃｔｉｎｇａｖｅｒａｇｅｌｏｗｓｐｅｅｄｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｆｉｌｔｅｒｐａｐｅｒａＳｎｉｔｒｉｔｅｉｎｄｉｃａｔｏｒｐａｐｅｒｍａｔｅｒｉａｌ，ｗｅｕｓｅｄｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄａｃｉｄｉｆｙｔｈｅｍａｔｅｒｉａｌ．Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｅｒｉｓｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｃｌｕｄｉｎｇｓｕｌｆａｎｉｌｉｃａｃｉｄ、８－ＨｙｄｒｏｘｙｑｕｉｎｏｌｉｎｅａｎｄＮ一（１一ｎａｐｈｔｈｙｌ）一ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｗｉｔｈｃＬ贯ｔａｌｎｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ．ＡｆｔｅｒＷｅｓｈｏｗｅｄｃｏｌｏｒ，ｔｈｅＩｎｄｉｃａｔｏｒｐａｐｅｒｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄｉｍａｇｅｔｈｒｏｕｇｈｓｃａｎｎｅｒ．ｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｐｒｅｐａｒｉｎｇｉｎｄｉｃａｔｏｒｐａｐｅｒｔｈｒｏｕｇｈａｎａｌｙｚｉｎｇｅｏｌｏｕｒｉｔｙｏｆｔｈｅａｉｍａｇｅ，ＳＯｋｉｎｄｏｆｎｅｗｎｉｔｒｉｔｅｉｎｄｉｃａｔｏｒＰａｐｅｒＣａｎｂｅｄｏｎｅ．ＩｔＣａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｌｙａｎｄｔｏｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｌｌｙｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｎｉｔｒｉｔｅ．Ｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｉｎｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅｉｎｆｏｏｄ．Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｔｈａｔｉｓｒａｐｉｄａｎｄｓｈａｗｉｓｏｎａｄａｐｔｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｔｈｅｓｃｅｎｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎｉｔｒｉｔｅ，Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｖｏｌｔａｍｍｃｔｒｙ，Ｍｅｔｈｙｌｏｒａｎｇｅ，Ｎｉｔｒｉｔｅｉｎｄｉｃａｔｏｒｐａｐｅｒ，Ｈａｎｇｉｎｇｍｅｒｃｕｒｙｅｌｅｃｔｒｏｄｅ，ＣｏｌｏｒａｎａｌｙｓｉｓⅡ独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南工业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：：妻墨缕日期：～Ｄ１、●弘关于论文使用授权的说明本人完全了解河南工业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；本人授权河南工业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名：：蕃墨当导师签名：日期．丝埠幽！ｚ：￡塑肉类食品中亚盐检测研究第一章绪论１．１引言亚盐是一种广泛存在于水体、蔬菜、加工食品等物质中的有害化学成分，但它作为一种食品添加剂，在国内外食品加工中应用广泛，尤其是作为肉类食品中的防腐剂和发色剂具有悠久的历史，主要是因为亚盐可保持肉制品的色、香、味，同时对肉毒梭状芽孢杆菌有抑制作用，具有一定的防腐性，迄今尚未发现理想的替代品【１１。亚盐对人体的危害表现在通过各种途径进入人体后，一方面会与血液中的血红蛋白结合，使正常的血红蛋白变性而失去携氧能力，导致人体组织缺氧，对血管产生扩张作用；另一方面，亚盐在适宜的条件下，可与肉中的氨基酸发生反应，或在人体胃肠道内和蛋白质的消化物二级胺和四级胺反应，生成致癌的亚硝胺【２】。联合国粮农及世界卫生组织专门委员会认为：每人每天对亚盐的摄入量应小于２０ｍｇ。近年来，一些国家已禁止使用亚盐作为食品添加剂【３】。包括我国在内的目前仍允许使用的国家，在允许使用量及肉制品的残留量上均有严格的限量规定，因此，亚盐含量的检测作为重要的监测项目与食品安全和人民身体健康密切相关，越来越受到人们的关注，并成为食品、卫生、环境、纺织、饲料等行业中重要的监测项目之一。如何方便、快捷、准确地检测出食品、饮料和饲料中的亚盐含量，建立高灵敏度、高选择性的亚盐测定方法是分析化学中的重要研究课题，有非常重要的实际意义。１．２亚根检测研究进展目前，国内外测定亚根的标准方法仍为重氮偶合比色法，该法灵敏度和选择性不高，反应试剂和显色反应本身稳定性较差，又是毒性较大的致癌物质，同时Ｃｕ２＋、Ｆｅ３＋、Ｓ２‘、Ｉ’等对测定有干扰，给测定带来不便。许多学者都试图对此方法进行改进或建立新的反应体系和新的方法，如催化光度法【４～、色谱法【７’３】、化学发光法１９］、荧光法、极谱法等。河南工业大学硕士学位论文１．２．１光度分析法１．２．１．１催化光度法１９８７年ＭｏｎｔｅｓＲ等开创性地使用溴酸钾作为氧化剂，运用动力学方法测定亚根，从根本上改变了亚根测定方法的经典模式，为亚根的无毒试剂测定开辟了新的道路【１０１。由于动力学光度分析方法具有较高的灵敏度，且仪器设备简单，因而催化光度法从２０世纪８０年代至今发展很快，但没有根本上的突破，大多是在稀硫酸、稀磷酸、盐酸、ＨＡｃ－ＮａＡｃ、醋酸等酸性介质中使用溴酸钾【１１～９１、氯酸钾［２０－２３１、溶解氧阱调、根的含量。所用的有机染料主要是偶氮染料、醌亚胺染料［２９。３１】和三苯甲烷类染料０２彤】等。反应条件各不相同，温度从２０℃～１００℃不等，反应时间从４ｒａｉｎ－６０ｒａｉｎ各不一样，终止反应的方法一般用冷水冷却，或加入抑制剂，常用的抑制剂有乙醇钠、硫酸联氨和ｐ∥ｍＬ。催化光度法虽然研究的比较多，但都停留在寻找新的指示剂，或改变介质和反应条件上，其原理一般认为氧化剂和酸性介质过量，固定反应时间，运用动力学方法求解，从而得到亚根浓度和吸光度的关系，实验一般先绘制标准曲线，然后测定样品的吸光度，从图中得到样品中亚根的浓度。由于催化光度法的测定条件不易控制，干扰因素较多，致使方法的重现性和稳定性相对较差。１．２．１．２分子荧光光度法在亚根测定研究中分子荧光光度法是研究较多的方法之一，其操作简便、快速、灵敏度较催化光度法高，所用试剂价廉易得、选择性好，是一种较好的检测方法．根据测定原理的不同可分为以下几种：（１）反应荧光猝灭法其主要原理是在酸性介质中，Ｎ０２一与荧光试剂发生反应使荧光淬灭，据此来测定亚根。基于此原理进行亚根测定研究的较多【３丘３７＇１，如董存智口８１等研究发现盐酸介质中，亚根的加入使罗丹明３ｃ，ｏ荧光强度明显降低，其降低程度与亚根的加入量存在良好的线性关系，从而建立了用罗丹明３ＧＯ荧光熄灭法测定亚根的新方法，可直接测定水样中的亚根。冯素玲【３９１等在硫酸介质中，亚根能还原吡咯红２双氧水【２７力司等氧化剂氧化有机染料，根据有机染料褪色的速度运用动力学方法来测定亚Ｖｃ等。检测限一般为２．４ｘ１０ｓ～２ｘ１０４２９／ｍＥ，测定范围０．００５～１２肉类食品中亚盐检测研究Ｙ，使其荧光猝灭，据此提出了测定痕量亚根的荧光分析法，方法的检出限为２．７ｎｇ／ｍＬ，线性范围为６．０—８８ｎｇ／ｍＬ，可直接用于电厂废水、自来水、井水中亚根的测定。２００３年，董存智Ｈｏ】等又研究了盐酸介质中亚根与藏红Ｔ发生的重氮化反应，基于藏红Ｔ的荧光强度随亚根的加入量增加而明显降低的现象来测定亚根，方法的检出限为４×１０母ｇ／ｍＥ，应用于水样中痕量亚硝根的测定，并对反应的机理进行了讨论。近期利用吖啶红与亚根发生亚硝化反应使其荧光强度降低来测定亚根的研究较多。如盐酸介质中，吖啶红与亚根发生亚硝化反应，其荧光强度降低，用吖啶红荧光猝灭值标准曲线法测定痕量亚根。在实验最适条件下，吖啶红的荧光猝灭强度与亚根的含量在０．０５～Ｏ．５ｐｇ／ｍＬ之间存在线性关系（ｒ－－０．９９８）；方法的检出限为７．５ｎｇ／ｍＬ；ＲＳＤ＝Ｉ．４３％～３．７７％；样品加标回收率为９０．４０％～１００．３０％［４”。（２）催化反应荧光猝灭法该方法基于酸性介质中亚根催化氧化剂氧化荧光试剂，使其荧光猝灭进而测定亚根。鲍所言【４２１等研究发现，在稀磷酸介质中，溴酸钾可氧化吖啶橙使之褪色并伴随着吖啶橙荧光强度的减弱，但反应速率较慢。痕量亚根的存在对该反应可起到显著的催化作用，使反应的灵敏度明显提高，体系的荧光猝灭程度加强。基于此采用固定时间法提出了一种灵敏度高、选择性好的催化荧光法测定痕量亚根的新方法，并研究了该方法的动力学条件。反应允许较大量的２０多种常见离子存在，同倍量的Ｆｅｓ＋，Ｂｒ－－、厂不干扰，在进行实际样品测定时，可加入适量ＥＤＴＡ对干扰较大的离子如Ｆ矿，ｃｕ２＋等进行掩蔽，从而达到测定的目的。亚根的线性范围为０．０５～５ｎｇ／ｍＬ，方法的检出限为０．０１２ｎｇ／ｍＬ。该法可用于水体和土壤中痕量亚根的测定。陈兰化１４３】等基于在稀磷酸介质中，亚根对溴酸钾氧化二氯荧光素反应的催化作用，建立了催化荧光法测定亚根的新方法。反应在７０℃水浴中进行１０ｒａｉｎ，是假零级反应，方法的线性范围为０．４～８．０腭几，检出限为２．０Ｘ１０ｄ２９／ｍＥ。该法应用于水样中痕量亚根的测定，结果满意。催化荧光法的实验方法、思路和催化光度法基本相同，不同之处是该法通过测定催化前后荧光强度差△Ｆ来测定亚根，灵敏度更高一些嗍。王克太【４５】等建立了催化动力学流动注射荧光法测定微量亚根的新方法，方法的河南工业大学硕士学位论文检测限为３．５ｐｇ，Ｌ，线性范围为８．０～１００．０烬几，进样频率为６５次／ｈ，为催化荧光法测定亚根提供了新思路。（３）氧化碘离子荧光猝灭法该法是在酸性介质中，ＮＯｚ－氧化Ｉ一生成游离态碘或其他价态的碘离子，使荧光试剂的荧光淬灭测定痕量亚根。１９９７年李建国㈣等拟定了荧光猝灭法测量痕量亚根的方法，在盐酸介质中，亚根氧化碘化钾的反应，其反应物１３一使罗丹明Ｂ荧光猝灭，方法的检出限为３．６鹏几，测定范围为１０～１２０ｐｇ／Ｌ。该法用于自来水，矿泉水及合成样品中亚根的测定，结果满意。此后朱展才［４７１等又建立了碘化钾与亚根在ｐｉｔ为７．６０的柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲体系中利用氧化还原反应生成游离碘使异硫氰酸荧光素荧光猝灭测定痕量亚根的方法，同样取得较好效果。有部分研究根据亚根与碘化钾反应生成单质碘，碘可以使２，７一二氯荧光素（ＤｃＦ）发生荧光猝灭，从而间接测定亚硝酯根，此法已用于合成样和分析纯试剂中亚根的测定，取得了良好的效果。荧光光度法是新发展起来的测定亚根方法，该法具有快速、灵敏、操作简便、干扰少、试剂易得等优点，但其测定条件不易准确控制，稳定性有待迸一步提高．１．２．１．３流动注射分光光度法催化光度法和荧光光度法测定亚根一般需要控制反应时间才能进行定量测定，而采用流动注射分光光度法由于进样方式、反应时间等条件的一致性，即使反应达不到完全的程度，仍可以进行定量测定，因而该法更方便、更准确、更快速，是一种自动化的检测方法，也是近年的研究热点之一。该法需要流动注射仪器，然后以分光光度仪为检测器测定亚根，使其受到。最近该方法的主要研究方向是流动注射与荧光光度法或化学发光相结合，灵敏度更高【４８捌】。如龚正君ｆ５２】等研究发现，酸性亚根与碱性鲁米诺反应产生很强的化学发光，从而通过测定发光强度测定亚根，建立了亚根在线分析化学发光新方法。另外，反相流动注射技术和催化光度的结合也是该法研究的一个方向，訾言勤【５玉跏等采用反相流动注射技术与催化光度法相结合，研究了亚根在盐酸介质中催化溴酸钾氧化维多利亚蓝的灵敏褪色反应，用自制的微机化流动注射分析仪能准确控制时间，优化了试验条件，建立了测定痕量亚根的反相流动注射催化光度新方法。４肉类食品中亚盐检测研究１．２．２电化学分析法电化学分析法具有仪器简单，操作方便，分析速度快等特点，近年来，在亚根测定的研究中越来越受到重视。目前，电化学分析法测定亚根的研究主要集中在极谱法、离子电极法和化学修饰电极法等方面。１．２．２．１极谱法采用极谱法测定亚根的研究已有不少报道。由于亚根还原电位太低，直接测定比较困难，所以一般采用间接测定法，根据测定原理不同主要可分为以下三类。（１）Ｎ０２－与变价金属离子形成配合物其主要原理是利用Ｎ０２一与变价金属离子形成配合物，催化变价金属离子电还原产生极谱吸附波来测定Ｎ０２一。魏显有鲫在含有巯基乙酸（ＴＧＡ）和钴（ＩＩ）的ｐＨ＝４．４的Ｈ２Ｓ０４－ＮａＡｃ介质中，得到一灵敏的亚根配合物单扫极谱吸附波，峰电位为一Ｏ．７５Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ）。峰电位与亚根浓度在１．１ｘ１０。３～８．７ｘ１０。６ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系，检出限为５．５ｘ１０母ｍｏｌ／Ｌ。该法简便快速，选择性好，用于水样和食品中痕量Ｎ０２一的测定，结果满意。（２）Ｎ０２一与某些有机化合物反应其原理是利用Ｎ０２一与某些有机化合物反应生成亚硝基化合物、重氮化合物或者偶氮化合物来间接测定亚根【５６１。如李建平【５７肄研究了甲基橙亚硝化产物的极谱波行为及反应机理，在０．６ｍｏｌ／Ｌ盐酸中，甲基橙与Ｎ０２一的亚硝化反应产物在极谱仪上于一０．３１Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ）可获得灵敏的极谱波，导数波波高与亚根浓度在１．０９ｘ１０－７～１．０９ｘ１０‘５ｍｏｌ／Ｌ范围内成正比，检出限为６．５２ｘ１０‘８ｍｏｌ／Ｌ，利用该法测定水样中的亚根获得较好效果。谢莉‘５８】等在稀盐酸介质中研究了吖啶红与亚根的亚硝化反应，利用反应产物的２．５次微分波，亚根浓度在０．０２～０．６ｐｇ／ｍＬ范围内与峰高呈线性关系，建立了极谱法测定亚根的新方法。其他一些反应体裂５９～删同样利用Ｎ０２一与某些有机化合物的反应产物所产生的极谱波或其导数微分波来间接测定亚根。（３）动力学极谱法其原理是利用Ｎ０２－对某些反应的催化作用，应用动力学极谱法测定Ｎ０２一。王良玉【６５１等利用Ｎ０２一在硫酸介质中对溴酸钾氧化酸性铬深蓝的反应有极强的催化作用，研究河南工业大学硕士学位论文了最佳反应条件，发现在氨缓冲溶液中酸性铬深蓝具有良好的极谱峰，以极变法监测催化反应过程中酸性铬深蓝浓度的变化，方法的线性范围为０．２０～１．３４ｐｇ／ｍＬ，检出限为０．０８８ｔｔｇ／ｍＬ，应用于雪水，雨水中痕量亚根的测定，结果满意。陈运生【６６】等利用在盐酸介质中亚根催化溶解氧氧化苯素紫的反应，李利军１６７】利用Ｎ０２－在稀硫酸介质中对ＫＢｒ０３氧化鸡冠花红褪色反应的催化作用，建立了新的测定Ｎ０２－的动力学极谱法。除以上三类外，张业明【６８】等在含稀硫氰酸盐的底液中，通过单扫示波极谱仪获得一灵敏的亚根催化波，峰电位为一０．４７Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），阳极化二阶导数峰峰高与亚根浓度在ｌｘｌ０＂７～５ｘ１０。５ｍｏｌ／Ｌ之间成线性关系，检测限达５ｘ１０一ｍｏｌ／Ｌ。该法具有较好的选择性，尤其是大量根存在时不干扰测定。该法测定了许多样品中的亚根均获得满意效果，作者对该波的机理进行了研究，结果证明该波是［ＣＮ．ＮＯ］催化溶液中的溶解氧还原所致。杨丽珠【６９】等在ｎｈｃ．ＫＣｌ．维生素Ｂ１２的存在下，采用单扫描极谱法测定Ｎ０２一，在一Ｏ．８２Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ）处产生灵敏的导数极谱波，检出限为１．０ｘ１０一ｍｏｌ／Ｌ，该方法灵敏、简单、快速，已用于天然水样中Ｎ０２－的测定。１．２．２．２离子选择性电极的应用离子选择性电极能以电极电位形式指示溶液中特定离子的活度，具有结构简单牢固，元件灵巧，灵敏度好，选择性高，响应速度快以及便于携带等特点［７０１。目前离子选择性电极在测定亚盐研究中主要是应用根离子选择性电极、碘离子选择性电极和染料电极通过间接方法测定。（１）根离子选择性电极的应用运用根离子选择性电极测定Ｎ０２－主要是用氧化剂将待测体系中的Ｎ０２一氧化为Ｎ０３－进行间接测定。这方面的研究开始较早［７１，７２］，可以同时测定体系中Ｎ０２一和Ｎ０３－的含量。秦汉明【７３】等在前人研究的基础上，研究了用根电极测定蔬菜、卤制品、雨水样品中根和亚根的含量，对电极性能、测定条件、干扰物的影响及消除、方法的准确度和精密度等进行了研究，并取得较好的效果。该方法最大的问题在于离子干扰的消除，尤其体系中根和亚根共存时，二者之间相互干扰和氧化剂的选择对检测的准确度和精密度有极大的影响。（２）碘离子选择性电极的应用６肉类食品中亚盐检测研究碘离子选择性电极测定ＮＯｂ一主要是利用Ｎ０２一对ＫＢｒ０３氧化Ｉ一的反应的强催化作用，用碘离子选择性电极跟踪Ｉ一，用动力学方法测定来Ｎ０２一。刘金霞【７４】等用碘离子选择电极跟踪Ｎ０２一催化ＫＢｍ３氧化Ｉ一的反应过程，发现在适宜条件下，该指示反应为一级反应，反应速度用电位变化ＡＥ表示。当时间固定，ＡＥ与Ｎ０２一浓度在０～１．６×１０－６ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系，检出限为１．４ｘ１０－１０ｍｏｌ／Ｌ。该方法可用于肉类、蔬菜、粮食和血清ｑ６Ｎ０２一的测定。赖晓绮嗍、陈铭【７ｑ等也对碘离子选择性电极测定Ｎ０２一进行了研究。该法灵敏度高、选择性好、线性范围宽、简便快速。（３）染料电极的应用运用染料电极测定Ｎ０２－主要是根据Ｎ０２一对一些染料的氧化还原反应的催化作用，以染料电极跟踪体系中相应染料浓度的变化来间接测定Ｎ０２－含量。胡卫平【７＿７ｌ等基于在稀磷酸介质中亚根对溴酸钾氧化甲基紫的反应具有明显的催化作用，应用自制的甲基紫选择性电极跟踪反应液中甲基紫浓度的变化间接测定Ｎ０２一。该方法在室温下进行，操作方便，样品溶液不受颜色。在选择的最佳条件下，检出限为７．６ｘ１０。７９／Ｌ，线性范围为８．０×１０４～８．０ｘ１０巧ｇ／Ｌ，应用于肉制品中亚根含量的测定。李贵荣［７８，７９１等先后研究了运用结晶紫电极和灿烂绿选择电极跟踪相应反应体系中染料浓度的变化间接测定痕量Ｎ０２一，并取得满意效果。１．２．２１３化学修饰电极化学修饰电极（ＣＭＥ）是指在半导体材料制作的电极表面上涂敷具有选择性的单分子、多分子、离子或聚合物的薄膜，借Ｆａｒａｄａｙ（电荷传输）反应或者界面电位差（非静电荷传输），而呈现出此修饰电极薄膜的化学、电化学以及光学的性质，是当前电化学、电分析化学方面十分活跃的研究领域，拓宽了电化学法的分析对象，其选择性、重现性也优于普通电极‘鲫。近年来，在测定Ｎ０２一研究中，化学修饰电极应用越来越多，根据电极修饰材料的不同可分为以下几类。（１）高分子聚合物作电极修饰材料在测定Ｎ０２－研究中，作为化学修饰电极修饰材料的高分子聚合物主要是有机染料聚合物。汪云【３１ｌ等制备了亚甲紫聚合修饰电极，研究了该修饰电极对亚根的电催化还７河南工业大学硕士学位论文原作用。亚根在亚甲紫聚合膜修饰电极上具有很好的电流响应，催化峰电流与亚根的浓度在１．０ｘ１０巧～３．０×１０。ｍｏｌ／Ｌ范围内呈现良好的线性关系。王瑜‘８２１等研究了聚中性红膜修饰电极对Ｎ０２一的催化氧化性能，Ｎ０２一的浓度在２．０ｘ１０钆５．０ｘ１０。ｍｏｌ／Ｌ范围内与催化氧化峰电流呈良好的线性关系，检测限为６．０ｘ１０４ｍｏｌ／Ｌ，若利用计时电流法分析，检测限可达８．０ｘ１０一ｍｏｌ／Ｌ。焦奎【８３】等制备的聚天青Ａ膜修饰电极和杨秋霞等ｌ删制各的聚灿烂甲酚蓝修饰电极应用于Ｎ０２一的测定，也取得了较好的效果。（２）生物高分子材料作电极修饰材料生物高分子材料也是化学修饰电极应用较多的修饰材料，常用的有聚氨基酸膜和壳聚糖等。在测定Ｎ０２－研究中，李佳【８５】等用共价键合法把壳聚糖修饰在玻碳电极表面，研究了Ｎ０２一在修饰电极上的阳极溶出伏安特性，修饰电极在Ｏ．１ｍｏＦＬＮａＮ０３（ｐＨ＝２．６０）底液中对Ｎ０２一有良好的吸附性和选择性，其峰电流与Ｎ０２一的浓度在１．５ｘ１０－６～１．０ｘ１０。ｍｏｌ／Ｌ范围内呈较好的线性关系；检测限可达２．０ｘ１０～ｍｏＦＬ。连惠婷‘８６】等制备了维生素Ｂ１２（ＶＢｌ２）修饰电极，该电极在Ｏ．１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ底液中对Ｎ０２一有良好的电化学催化作用的选择性，其催化电流在Ｎ０２一浓度为０．１０～２．００ｍｏｌ／Ｌ范围呈线性关系，Ｎ０２一的浓度低至０．０１ｍｏｌ／Ｌ仍可定量测定，天然水中常见的离子不干扰测定，应用于雨水和湖水中Ｎ０２－的测定，回收率为１０１％．１０３％。兰雁华【８刀等报道了一种对Ｎ０２一具有高灵敏度和选择性的甲壳素修饰碳糊电极，检测限为１．０ｘ１０母ｍｏｌ／Ｌ，线性范围２．０ｘ１０－９～２．０ｘ１０４ｍｏｌ／Ｌ，可直接富集和测定水样中的亚根含量，大多数离子对测定无干扰，回收率９６．Ｏ％～１１０．Ｏ％。（３）多酸化合物作电极修饰材料元素周期表ＶＢ组（Ｖ，Ｎｂ，Ｔａ）和ⅥＢ组（Ｃｒ，Ｍｏ，ｗ）元素的氧化物可经历缩合反应形成同多酸和杂多酸，它们可与有机物混合通过电聚合获得多酸化合物薄膜。多酸化合物修饰电极研究始于１９８５年，其后得到了迅速的发展，近年来在测定Ｎ０２一研究中有广泛应用。黄杉生【８８１等研制了Ｄａｗｓｏｎ型杂多酸Ｐ２ｗ１８．１．萘胺化学修饰电极，在弱酸性介质中，该电极对Ｎ０２－的氧化有电催化作用。Ｎ０２一的浓度在ｌｘｌ０。６～ｌｘｌ０４ｍｏｌ／Ｌ范围内，催化电流与亚根浓度成线性关系，该电极已成功用于水样中Ｎ０２－含量测定。吴鸣虎【８９】等用电化学方法在导电基体玻碳电极上制备出磷铝钒杂多酸一聚吡咯膜修饰电极，电极对酸性水溶液中的Ｎ０２－具有良好的电催化还原作用，Ｎ０２一的浓度在５．０ｘ１０击～１．０ｘ１０。２８肉类食品中亚盐检测研究ｍｏｌ／Ｌ范围内，与催化峰电流呈良好的线性关系，检出限可达１．０ｘ１０４ｍｏｌ／Ｌ。段德良【她叼等分别研究了镧、铱、钯取代Ｄａｗｓｏｎ型钨磷杂多酸聚吡咯薄膜修饰电极的制备及其电化学性能，并成功应用于痕量Ｎ０２一测定。孙向英ｆ叫等制备的ＰＰｙ／Ｐ２Ｗ１７／Ｇｃ化学修饰电极和翟剩勇【舛】等制备的杂多酸多层膜修饰电极也成功应用于痕量亚根的测定。１．２．２．４其他电化学方法在应用电化学分析法测定亚根的研究中，除以上介绍的分析方法外，还有其他方法。如：新型亚根电化学传感器的研制ｐ５—矧，库仑滴定法和安培滴定澍９９】，压电石英传感器的应用【１００１等。目前这些方法的研究都处在探索改进阶段，尤其新型亚根电化学传感器的研究，国内研究相对还较少，国外已经开始了亚根生物电化学传感器的研制，其选择性更好，检测精密度、准确度更高，是亚根电化学传感器未来研究方向。１．２．２．５小结由于电化学分析法仪器简单，操作方便，分析速度快，所使用仪器便于与计算机联机自动化，因此Ｎ０２一的电化学分析法测定研究发展很快。目前测定痕量亚根的研究主要是应用离子选择性电极，化学修饰电极和极谱法。实验测定均在室温下进行，测定速度快，检出限低。电化学分析法虽然具有很多优点，克服了光度法的一些不足，但是目前的研究还存在线性范围窄，离子干扰等问题，尤其是化学修饰电极的研究应用还处在探索试验阶段，因此电化学分析法测定亚根的研究还在不断发展进行中。分析工作者一方面应从研究新型的电极和新的电化学分析方法入手，改进现有电极和分析方法的不足，深入探讨电化学分析测定亚根的机理，另一方面应加大对新型亚根电化学生物传感器的研究，使亚根的测定向高精度高敏度方向发展。１．２．３其它分析方法测定亚根研究中，除以上方法外，色谱法、原子吸收法等方法的研究也取得了进展，其中以色谱法的研究较多，尤其离子色谱在测定亚根中的应用，取得很大进展。９河南工业大学硕士学位论文色谱法测定亚根首先将可能对亚根测定不利的离子和亚根分开，然后以紫外可见光分光光度仪或电导仪等为检测器，即使用联用技术。一般测定亚根的同时可测定多种离子，这种方法更加准确，解决了以上几种方法存离子影响的问题。目前的研究主要是运用离子色谱，如国内较早开始这方面工作的朱岩１１０１］等就是利用离子色谱法配合紫外分光光度仪来测定肉类中的根和亚根，得到了较好的效果。辛梅华【１蚴等采用反相离子对色谱—安培检测法同时测定了离子和非离子化合物Ｎ０２一、ＳＣＮ一、Ｃ删ＮＨ２，并对影响分离的诸因素进行了研究，在１５ｍｉｌｌ内三组分可完全分离，检测限在ｎｇ／ｍＬ级，这种方法已应用于工业废水和环境水质中这３种组分的监测。梁镰型１０３１等应用低压离子色谱技术，低压离子色谱采用低压蠕动泵代替高压平流泵输送洗脱液大大节省了设备费用。实验采用双柱系统的离予色谱仪，用电导检测器，选择适当的洗脱液浓度和流速。地面水试样先用银型预处理柱除去氯离子，成功地测定了其中的Ｆ一、Ｎ０２一、Ｎ０３］岛子，达到了常规水质分析的要求。夏正斌等１１０４１研究了低压离子色谱一流动注射分析（Ｆ认）联用连续测定水中ＮＦｈ＋、Ｎ０３一、Ｎ０２一的方法，借助于低压离子色谱柱和合理的ＦＩＡ流路，将Ｎ０３一、Ｎ０２一分离并还原为ＮＨ４＋，再与原样中的ＮＨ４＋一起依次与纳氏试剂（Ｋ２Ｈｇｌ４）进行显色反应，然后用吸光光度法检测，该法选择性好，应用简单，不仅在使用一个检测器的条件下实现了以三种化合状态存在的氮的连续测定，而且为其它元素的形态分析提供了一个可供借鉴的，切实可行的方法。近期色谱法测定亚根的研究还有将毛细管电泳与流动注射分析结合，抑制型色谱和高效液相色谱．安培检测器联用的技术等。色谱法是发展比较快的一种方法，其精确度高，可同时测定多种成分，是亚根分析测试的重要研究方向之一，但是由于其需要大型仪器，样品处理要求较高，对于现场快速测定而言，受到一定的。１０肉类食品中亚盐检测研究１．３本论文的主要研究内容１）根据室温下亚根在硫酸介质中强烈催化溴酸钾氧化甲基橙反应的原理，运用电化学工作站，研究甲基橙在悬汞电极上的电化学行为，建立测定亚盐的快速定量分析方法，并应用于肉类食品亚盐的检测。２）运用图象处理技术研制亚盐快速测定试纸，选择新的显色剂体系，并运用该亚盐快速测定试纸定性定量测定肉类样品中的亚根。河南工业大学硕士学位论文第二章导数伏安法测定亚根研究电化学分析法灵敏度、准确度高，选择性好，分析速度快，所使用的仪器装置较为简单，操作方便，便于与计算机联机实现自动化。因此，近年在亚根检测的研究中电化学分析法越来越受到重视。伏安分析法是基于电极反应过程中ｆ＿ｕ关系曲线特性而建立起来的电化学分析法，具有灵敏度高，分析速度快等特点。本章应用电化学分析工作站，运用导数伏安法研究了测定亚根的各种最佳测定条件，并将该方法应用于肉类食品中亚盐的检测。２．１实验试剂与仪器仪器：ＬＩＢＲＯＲＡＥＬ一１６０电子天平（０．１ｉｎｇ）日本岛津公司北京博劢行仪器有限公司江苏省金坛市宏华仪器厂广东容声电器股份有限公司上海博训实业有限公司亚沸石英蒸馏器数显电子恒温水浴冰箱电热鼓风干燥箱ＤＦ．２００２电化学分析工作站三电极系统：郑州杜甫仪器厂悬汞电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂电极为参比电极试剂：亚钠分析纯分析纯分析纯分析纯分析纯分析纯焦作市化工三厂天津化学试剂厂广州化学试剂厂洛阳市化学试剂厂洛阳市化学试剂厂洛阳市化学试剂厂溴酸钾甲基橙氨水硫酸醋酸肉类食品中亚盐检测研究盐酸硼砂分析纯分析纯洛阳市化学试剂厂西安化学试剂厂其他试剂均为分析纯实验配制的主要溶液：亚根标准溶液：用１１０℃干燥过的ＮａＮ０２准确配成ｌｍｇ／ｍＬ的亚根贮备液（于４℃避光低温保存），使用时逐级稀释成亚根标准工作溶液。ＫＢｒ０３溶液：５Ｘ１０也ｍｏｌ／Ｌ；甲基橙溶液：２Ｘ１０４ｍｏｌ／Ｌ；ｍｏｌ／Ｌ；Ｈ２Ｓ０－溶液：Ｏ．５０氨水溶液：２．０ｍｏｌ／Ｌ。实验用水为二次石英蒸馏水。２．２实验原理与实验方法２．２．１实验原理本实验根据室温下亚根在硫酸介质中强烈催化溴酸钾氧化甲基橙反应的原理，运用电化学工作站，研究了甲基橙在悬汞电极上的电化学行为，通过跟踪反应中甲基橙二阶导数峰电流的变化来测定亚根浓度。通过实验发现，在硫酸介质中，亚根强烈催化溴酸钾氧化甲基橙褪色，以悬汞电极为工作电极，在氨性缓冲溶液中运用导数线性扫描伏安法，甲基橙可获得良好的电流蜂，在一定条件下，催化反应速度与溶液中的亚根浓度成正比，而催化反应的速度与甲基橙电流变化成正比，据此建立测定亚根的新方法。２．２．２实验方法在两支２５ｍＬ的比色管中，分别加入甲基橙溶液和溴酸钾溶液，再加入Ｈ２Ｓ０４溶液，其中一支比色管加入一定量Ｎ０２一试样溶液，用水稀释到１０ｍＬ摇匀，放置１０分钟，然后迅速加入氨水溶液，稀释到２５ｍＬ，摇匀，转入小烧杯，然后以悬汞电极为工作电极，铂电极为辅助电极，饱和甘汞电极为参比电极进行导数线性伏安扫描进行阴极化扫描，河南工业大学硕士学位论文在．５４０ｍＶ获得甲基橙二阶导数电流峰（如图２－１），分别测量试样溶液峰电流（Ｉ）及空白溶液峰电流（１０），计算△Ｉ＝Ｉ－－Ｉｏ。２占馁■—纠ｋｌ２起ｆｕ℃＝＝＝：歹＼．３００００．３６０００．４２０，００．４８０∞－５４Ｑ００·６００∞－８６０００·７２ＱＢＯ·７８０００·８４００Ｑ电位Ｏｍ图２－１甲基橙的二阶导数伏安图１．加入Ｎ０ｚ一前：２．加入Ｎ０ｚ－后２．３结果与讨论２．３．１测试底液的选择亚根催化溴酸钾氧化甲基橙的反应是在酸性条件下进行，因此试验分别选用Ｈ２ｓ０４、ＨＣｌ、ＨＡｃ、Ｈ３Ｐ０４等多种酸性介质作为底液进行试验，结果显示，在酸性介质中，甲基橙在工作电极上无法获得稳定灵敏的电流峰。试验又分别选用ＫＣｌ、Ｈ２Ｓ０４－ＮＨ３·Ｈ２０、Ｈ２Ｓ０４－ＮａＯＨ、ＨＣＩ－ＮＨ３’Ｈ２０、ＨＣｌ－ＮａＯＨ、ＨＡｃ－ＮＨ３．Ｈ２０、Ｈ，Ｐ０４－ＮＨ３·Ｈ２０等多种底液进行了选择性试验。结果表明，在Ｈ２Ｓ０４一ＮＨ３．Ｈ２０、ＨＣｌ－ＮＨｒＨ２０、ＨＡｃ－ＮＨ３·Ｈ２０三种碱性底液中甲基橙均可获得较好电流峰。１４肉类食品中亚盐检测研究图２—２为甲基橙在三种介质中的循环伏安曲线图，由图可以看出，在三种底液中甲基橙均有较稳定的还原峰，且峰形良好。．０３０．０３６＿０Ｊ４２－０－艟加５４．０．卯Ｅ（ｖ）．０Ｊ铂加７２∞７９－０．８４－０９０图２．２不同底液中甲基橙的循环伏安曲线３．姒ｃ一一Ｈ，‘Ｈ２０１．１ｔ２Ｓ０，一ＮＨ３·Ｈ２０２．ＨＣｌ—ＮＨ，·Ｈ２０综合以上结果，试验首先在酸性介质中以Ｎ０２－催化ＫＢｒ０３氧化甲基橙的反应，再加入碱性试剂中止反应，并且以此作为底液检测甲基橙电流峰峰值，间接测定亚根浓度。试验发现催化反应在ＨＡｃ、ＨＣＩ、Ｈ２Ｓ０４中均可进行，但室温条件下，催化反应在三种介质中的反应速率不同，表２．１列出了相同试验条件下催化反应在三种不同酸性介质进行时，甲基橙二阶导数电流峰变化值△Ｉ随反应时间变化的结果。由试验结果可以看出，在ＨＡｃ介质中，Ｎ０２一催化ＫＢｒ０３氧化甲基橙的反应速度过于缓慢，用于测定时，灵敏度较低；而在ＨＣｌ介质中，Ｎ０２一催化ＫＢｒ０３氧化甲基橙的反应速度过快，无法用于定量检测。在硫酸介质中，催化反应速度适中平稳，有利定量测定，试验选用Ｈ２Ｓ０４－ＮＨ３·Ｈ２０作为测试底液。河南工业大学硕士学位论文表２－Ｉ底液对催化反应速率影响注：催化体系中Ｎ０２－加入量均为０．１ｍｇ／Ｌ２．３．２甲基橙的线性扫描二阶导数电流峰性质２．３．２．１甲基橙循环伏安图按照试验方法在电化学分析工作站上对甲基橙试验溶液做循环伏安图，试验发现在一０．５４Ｖ处有较强的还原电流峰，但没有氧化电流峰，说明甲基橙在工作电极上的反应是不可逆，如图２—３。．０∞．０＿３６．０砣．０４８．０ｊ４－０∞－０尉－０ｍ－０盈．０艄－０９０Ｅ一）图２．３甲基橙循环伏安图２．３．２．２甲基橙线性扫描伏安曲线按实验方法对试液进行线性扫描，结果表明，在ＨｚＳＯ，介质中，甲基橙不产生灵敏的电流峰，而在氨性缓冲介质中可产生灵敏的电流响应峰。如图２－－４为甲基橙的线性扫描电流峰和线性扫描二阶导数电流峰，其中甲基橙的二阶导数电流峰峰形稳定，灵敏，峰位不受溴酸钾的影响。在试液中加入少量表面活性剂十二烷基苯磺酸钠后甲基橙电流１６肉类食品中亚盐检钡４研究峰迅速降低，由此可见，甲基橙的电流峰应为吸附电流峰。图２－４甲基橙线性扫描电流峰注：ｌ线性扫描电流峰２二阶导数电流烽３加入表面活性剂后二阶导数电流峰２．３．２．３静止时间的影响随着静止时间的增长，甲基橙二阶导数峰峰电流增大，当静止时间到达７Ｓ时，峰电流稳定且略有下降，表现出明显的吸附性质，如图２．５。试验选取静止时间为６Ｓ，此时，甲基橙可获得最大的峰电流，提高了检测的灵敏度。看ｇ§０２４６８１０１２ｔ（ｓ）图２－５静止时间的影响１７河南工业大学硕士学位论文２．３．３硫酸用量的影响固定其他试验条件，改变硫酸（Ｏ．５ｍｏｌ／Ｌ），用ｌ，考察介质的酸度对甲基橙二阶导数峰电流及峰电位的影响及其对催化和非催化反应速度的影响。２．３．３．１硫酸用量对甲基橙峰电流及峰电位的影响实验表明，随着硫酸用量的增大，酸度不断升高，甲基橙的线性二阶导数峰电位正移（如图２．６），而其二阶导数峰峰电流值变化不大（如图２·７）。—５００一５１０—５２０著一５３０趔一５４０脚誊一５５０－５６０—５７０－５８０００．５１Ｉ．５硫酸用量（ｍＬ）图２－６硫酸用量对峰电位的影响４．７４．６８善罨４．６６嚣脚誊４．６４４．６２４．６００．２５０．５０．７５１１．２５１．５１．７５硫酸用量（ｍＬ）图２－７硫酸用量对峰电流的影响１８肉类食品中亚盐检测研究２．３．３．２硫酸用量对非催化反应的影晌按实验方法，固定其他试验条件，反应体系不加入Ｎ０２一，改变硫酸用量，测定非催化反应中甲基橙二阶导数电流峰变化值ＡＩ（溴酸钾加入前后的峰电流差）。实验结果如图２．８所示，随着Ｈ２Ｓ０４用量增大，反应介质酸度升高，甲基橙二阶导数电流峰变化值△Ｉ随之升高，说明酸度升高使ＫＢｒ０３氧化甲基橙的能力大大加强，从而增大了实验的空白值，降低了Ｎ０２的催化作用，对测定不利，因此硫酸用量不宜过大。Ｏ·６０·５薯ｏ·４三ｏ．３＝ｑＯ．２０·１０ＯＯ．５１１．５硫酸用量（札）图２—８硫酸用量对非催化反应的影响２．３．３．３硫酸用量对催化反应的影响按实验方法，固定其他试验条件，改变硫酸用量，测定催化反应体系中甲基橙二阶导数电流峰变化值△Ｉ（Ｎ０２一加入前后峰电流差）。试验结果如图２－９，随着硫酸用量增大，△Ｉ迅速增大，催化反应速度增大，但是酸用量过大，非催化反应速度过快，无需Ｎ０２一催化ＫＢｒ０３即可迅速氧化甲基橙，使试验的空白值增大，因此酸度控制在合适的范围内。１９河南工业大学硕士学位论文５４３２ｌ０００．５ｌ１．５２硫酸用量（ｍＬ）图２－９硫酸用量对催化反应影响综合以上试验结果，硫酸用量应控制在合适的范围内，即保证催化反应的速度，又降低非催化反应的影响，减小测定的空白值，本实验选取硫酸（Ｏ．０５ｍｏｌ／Ｌ）用量Ｏ．５该酸度条件下，非催化反应速度较小，催化反应的速度适中，有利亚根测定。２．３．４溴酸钾用量的影响按试验方法，固定其他试验条件，改变溴酸钾（５×１０之ｔｏｏｌ／Ｌ）用量，考察其对测定的影响。ｍＬ，２．３．４．１溴酸钾用量对非催化反应的影响试验结果表明，溴酸钾用量对甲基橙峰电位没有影响；随着溴酸钾用量的增大，非催化反应体系中甲基橙二阶导数电流峰变化值△Ｉ（溴酸钾加入前后的峰电流差）增大，即非催化反应速度增大，如图２－１０，从而使试验的空白值增大，因此，溴酸钾的用量应控制在合适的范围。肉类食品中亚盐检测研究０．３０．２５０．２葺詈０．１５司０．１０．０５ＯＯ０．５ｌ１．５ＫＢｒ０３用量（ⅢＬ）图２．１０滨酸钾用量对非催化反应的影响２．３．４．２溴酸钾用量对催化反应的影响按实验方法，固定其他试验条件，改变溴酸钾用量，测定催化反应体系中甲基橙二阶导数电流峰变化值△Ｉ（Ｎ０２一加入前后峰电流差）。试验结果如图２．１１，随着溴酸钾用量增大，△Ｉ增大，即催化反应速度增大，但是溴酸钾用量过大，非催化反应速度过快，无需Ｎ０２一催化ＫＢｒ０３即可迅速氧化甲基橙，使试验的空白值增大，因此溴酸钾用量控制在合适的范围内。５４·５４，、３．５曼３詈２．５：２．日１．５１０．５００．５１１．５２溴酸钾用量（皿Ｌ）图２一１１溴酸钾用量对催化反应的影响２ｌ河南工业大学硕士学位论文综合以上试验结果，溴酸钾用量应控制在合适的范围内，即保证催化反应速度，又降低非催化反应的影响，减小测定的空白值，本实验选取硫酸（５ｘｌＯ之ｍｏｌ／Ｌ）用量０．８ｍＬ，该酸度条件下，非催化反应速度较小，催化反应的速度适中，有利亚根测定。２．３．５氨水用量的影响按实验方法，固定其他试验条件，改变氨水（２ｔｏｏｌ／Ｌ）的用量进行试验。结果表明，随着氨水用量的增加，甲基橙二阶导数电流峰峰电位向负方位移动，如图２．１２。氨水用量增加使甲基橙二阶导数峰峰电流稍有增大，当其用量大于３ｍＬ时，峰电流趋于稳定，如图２—１３；氨水的加入有中断催化反应的作用，因此加入量应能够快速终止反应的进行。综合以上各种因素，本实验选用２ｍｏｌ／Ｌ氨水用量为３ｍＬ，此时可迅速有效的中止催化反应，并且甲基橙二阶导数峰峰电流稳定，峰形良好。４．７４．６《｜４．５斌４．４雹掣４．３４．２０２３４５Ⅻ３·比０用量（ｍＥ）图２－１２氨水用量对峰电流影响肉类食品中亚盐检测研究－４８０—５００暑－５２０髫一５４０－５６０－５８００ｌ２３４５氨水用量（ｍＬ）图２．１３氨水用量对峰电位影响２．３．６甲基橙用量的影响按试验方法，固定其它试验条件，改变甲基橙（２ｘｌＯ。４ｍｏｌ／Ｌ）用量进行试验，实验结果表明，随着甲基橙用量的增加，甲基橙的二阶导数峰峰电流增大，但当用量大于２．０ｍＬ时，甲基橙的二阶导数峰电流变化很小，电流峰峰形开始变差，不利用定量测定，如图２．１４。甲基橙浓度的增加有利于提高测定的线性范围，但用量过大，峰形不稳定，对测定不利。甲基橙用量在１．２～１．８ｍＬ时，峰形稳定，催化反应进行平稳，故实验选用１．５ｍＬ。６５４３２．麟脚誊１Ｏ００．５１１．５２２．５３甲基橙用量（ｍＬ）图２—１４甲基橙用量的影响２３河南工业大学硕士学位论文２．３．７温度和反应时间的影响固定其它试验条件，试验考察了１８～６０℃范围内ＡＩ（Ｎ０２一加入前后的电流差）随温度Ｔ的变化情况。结果表明，随着温度的升高，催化反应速度加快，△Ｉ增大，但是当温度大于４０℃后，由于非催化反应的速度过大，△Ｉ反而减小，Ｎ０２一催化作用降低，影响定量检测，降低了检测的灵敏度，如图２一１５。本实验选用室温条件（２５℃），此时非催化反应十分缓慢，而催化反应速度适中，有利定量测定，而且操作方便，保证了方法灵敏度。２·５２童暑１．５图２－１５温度对反应速率的影响试验考察了反应时间对测定影响，结果表明室温条件下，反应时间在７～１５ｍｉｎ内，Ｎ０２－浓度与△Ｉ有较好的线性关系。本实验选用１０ｒａｉｎ，既保证测定的灵敏度，又能获得良好的线性关系和线性范围。２．３．８起始电位和扫描速率的影响按照试验方法，固定其它试验条件，考察起始电位和扫描速率对测定的影响。试验结果表明，随着起始电位的正移，甲基橙二阶导数峰峰电流先增大后减小，当起始电位为一Ｏ．３０ｖ，峰电流最大，如图２－１６。在５０～４００ｍＶ／ｓ范围内改变扫描速率测定甲基橙二阶导数峰峰电流，结果发现，峰电流随着扫描速率的增加而增加，如图２．１７。扫描速率的提高，有利于提高测定的速度，但是随着扫描速率加快，甲基橙的电流峰峰形变的不稳定，测定的重现性变差。试验选肉类食品中亚盐检测研究取扫描速率１００ｍＶ／ｓ，此时甲基橙峰形稳定，有利于提高测定的重现性，而且测定速度较快。，、４．售ｇｇ壤翟警３．图２—１６起始电位对峰电流的影响６５·５＾ｉｇ髫５髫４．５４３．５０１００２００３００４００ｆｉｏｏ扫描速率（ｍｖ／ｓ）图２—１７扫描速率对峰电流的影响２．３．９线性范围和检测限在选定实验条件下，按实验方法取不同量的亚根标准溶液进行线性范围试验，并绘制标准工作曲线（图２．１８）。实验结果表明亚根浓度在２．３×１０‘６～５．３ｘ１０４２５ｇ／Ｌ河南工业大学硕士学位论文范围内与峰电流差△Ｉ具有良好的线性关系，曲线的回归方程为：△Ｉ＝５．８０７ＣＮ０２．（ｒａｇ·Ｌ。１）＋０．２９５２，相关系数间．９９８２。由空白的标准偏差Ｓ＝２．０４×１０。３（ｎ＝１１）及标准曲线斜率ｋ，求得本法的检出限（３Ｓ哟为１．０５ｘｌＯ击ｇ，Ｌ。４３．５３鼋２．５暑２Ｖ与１·５１Ｏ·５００．３０．４０．５０．６ＣＮ∞．（Ｉｇ／Ｌ）图２－１８标准工作曲线２．３．１０精密度试验为了保证方法的可靠性，必须考察所建立方法的精密度。按照试验方法，对浓度为０．２５０ｒａｇ＆亚根标准溶液平行测定ｌＯ次，试验结果如下表。表２－２精密度测定值肉类食品中亚盐检测研究２．３．１１干扰离子试验按上述实验方法，考察了常见的阴阳离子对浓度为Ｏ．１ｍｇ／ＬＮ０２一的干扰情况，结果表明，相对误差在士５％以内，１５００倍的Ｋ＋、Ｎ矿、Ｃａ２＋、Ｍｇ＞、ＮＨ４＋、Ｃ１一、Ｎ０３一、Ｃ０３２．、ｓ０４２一，１０００倍的Ａ１３＋、ｃｄ２＋、Ｐｂ２＋、Ｈ矿、Ｉ一、Ｆ一、Ｂｒ一；５００倍的ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋、Ｐ０４３．、Ｓ２－；２００倍的Ｂａ２＋、Ｚｎ２＋；５０倍的Ｆｅ３＋、Ａｇ＋、ＳＯａ２一不干扰测定。２．４样品测定称取５．０００ｇ绞碎的肉制品于５０ｍＬ烧杯中，依据国家标准处理样品【慨１０６１，吸取适量滤液于５０ｍＬ容量瓶中，然后根据实验方法测定，由工作曲线计算亚盐含量，并与国标法【１０６１测定结果对照，结果如表２．３。在样品中加入不同量的亚根标准，测定回收率在９７％～９９％之间（如表２．４）。表２－３肉类样品中Ｎ０ｚ一分析结果（ｎ＝８）河南工业大学硕士学位论文表２－４回收率试验２．５本章小结基于亚根在硫酸介质中强烈催化溴酸钾氧化甲基橙反应的原理，运用电化学工作站，研究了甲基橙在悬汞电极上的电化学行为，运用导数线性扫描伏安法跟踪反应中甲基橙二阶导数峰电流的变化来测定亚根浓度，由此建立起一种新的测定亚根浓度的方法。优化实验条件为：２×１０‘４ｍｏＦＬ甲基橙溶液用量１．５ｍＬ；５×１０也ｍｏｌ／Ｌ溴酸钾溶液用量Ｏ．８ｍＬ；０．５０ｍｏｌ／ＬＨ２Ｓ０４溶液用量Ｏ．５ｍＬ：２．０ｍｏｌ／Ｌ的氨水溶液用量３．０ｍＬ；起始电位一０３０ｖ，扫描速率１００ｍＶ／ｓ，静止时间６ｓ。在－５４０ｍＶ获得甲基橙二阶导数电流峰，分别测量试样溶液峰电流（Ｉ）及空白溶液峰电流（Ｉｏ），计算ＡＩ＝Ｉ－－Ｉｏ。该方法在室温下进行，操作方便，样品溶液不受颜色。试验条件经过优化，在选择的最佳试验条件下，检测限可达１．０５×１０４９几，线性范围２．３ｘ１０４～５．３ｘ１０－４９／Ｌ。测定几种肉制品中亚根的含量，回收率在９７％～９９％之间，效果满意。肉类食品中亚盐检测研究第三章亚盐快速测定试纸研制亚根含量是食品、卫生、环境、纺织、饲料等行业中重要的监测项目之一，建立快速、准确的测定亚根含量的方法，尤其是可应用现场检测的简便方法具有十分重要的现实意义。目前，亚根现场检测方法主要有试剂盒法，试纸法和亚根检测仪等方法，其中试纸法具有快捷、价廉、简便、省力、携带方便等特点，是现场快速测定中最常用的方法。本文研制了新型亚根快速测定试纸，并结合图像处理技术，通过色度分析，快速准确地测定出样品中亚盐的含量。３．１实验试剂与仪器仪器：ＤＺＦ一４型真空干燥器Ｈｐ上海医用恒温设备厂Ｓｃａｎｊｅｔ４３７０平板扫描仪中国惠普有限公司日本岛津公司广东容声电器股份有限公司北京博劢行仪器有限公司ＬＩＢＲＯＲＡＥＬ－１６０电子天平（Ｏ．１ｍｇ）冰箱亚沸石英蒸馏器各种型号的滤纸杭州富阳特种纸厂联想集团有限公司家用台式计算机试剂：对氨基苯磺酸盐酸萘乙二胺８．羟基喹啉亚钠盐酸磷酸硫酸分析纯分析纯分析纯分析纯分析纯分析纯分析纯上海试剂三厂天津市瑞金特化学品有限公司上海山浦化工有限公司焦作市化工三厂洛阳市化学试剂厂洛阳市化学试剂厂洛阳市化学试剂厂河南工业大学硕士学位论文醋酸分析纯洛阳市化学试剂厂酒石酸分析纯天津市科密欧化学试剂厂其他试剂均为分析纯实验配制的主要溶液：亚根标准溶液：用１１０＂（２干燥过的ＮａＮ０２准确配成１ｍｇ／ｍＬ的亚根贮备液（于４℃避光低温保存），使用时稀释成逐级稀释成亚根标准工作溶液。磷酸溶液０．１ｍｏｌ／Ｌ对氨基苯磺酸溶液４ｇ／Ｌ盐酸萘７，－－胺２ｇ／Ｌ８·羟基喹啉２ｇ／Ｌ分析用水为二次石英蒸馏水在酸性条件下，亚根常温可以与重氮化试剂发生重氮化反应，然后与偶联试剂本实验中试纸材料选用普通慢速定性滤纸，以磷酸酸化试纸，重氮化试剂选用对氨滤纸首先在磷酸中酸化，然后在对氨基苯磺酸，盐酸萘乙二胺，８－羟基喹啉的混通过建立标准参比色卡，可以定性的快速鉴定亚根的含量。将显色后的试纸通过家用扫描仪扫描为图片，通过色度分析，取显色试纸的亮度和３．２实验原理与实验方法反应偶合生成有色物质，使人们能够很容易的通过肉眼感知，从而定性定量测定亚根。基苯磺酸，偶联试剂选用盐酸萘乙二胺和８一羟基喹啉复合体系。合溶液体系浸泡一段时间，放入真空干燥器中干燥后，避光低温保存，可用于亚根的定性定量检测。ＲＧＢ（Ｒｅｄ．Ｇｒｅｅｎ，Ｂｌｕｅ）值，通过研究它们与亚根浓度的关系，据此优化试纸的制备条件，并用该试纸测定出样品中亚盐的含量。肉类食品中亚盐检测研究３．３结果与讨论３．３．１试纸显色指标的选择不同试纸显色后颜色梯度的差异通过目测判断具有主观因素，缺乏科学性，且干扰因素较多，天气、照明条件等环境因素的变化及人眼观察的主观性、身体疲劳程度等原因，常常给结果带来很大的差异，重复性和再现性较差，不利用试验条件的优化。本实验选用色度分析的方法对显色试纸色度变化进行表征，从而优化试验条件，制备显色效果最佳的亚根快速测定试纸，并用于亚根快速定量测定。３．３．１．１图象采集设备的选择本试验是通过图象采集设备将显色试纸采集为图象，然后通过计算机图象处理软件取色度值进行分析。常用的图象采集设备有数码照相机，扫描仪，视频信号数字化仪，彩色摄象机等。根据本实验的要求，以数码照相机和扫描仪作为图象采集设备较为合适。数码相机是立体取像，不同的拍摄角度和拍摄条件对拍摄的图像有影响，色彩变化较大，容易造成试验误差，不利于图象色度的试验对比。扫描仪是平面取像，干扰因素较小，有利于对比试验，而且扫描仪的性价比高，有较好的色彩和较高的分辨率，目前市场上一般普通平板扫描仪分辨率最大可达３６００ｘ７２００ｄｐｉ（每英寸的像素点数），图象色彩失真较小，因此对试验图象色度的取值十分有利。本实验选用Ｈｐｓｃａｎｊｅｔ４３７０平板扫描仪作为图象采集设备，图像获取速度快，图像色彩保真效果好，使用方便。３．３．１．２色度指标体系选择常用来表征色度的模式【１０７１有以下几种：（１）ＨＳＢ模式：ＨＳＢ模式是基于人眼对色彩的观察来定义的，在该模式中，所有的颜色都用色相或色调（Ｈ）、饱和度（Ｓ）、亮度（Ｂ）三个特性来描述。（２）ＲＧＢ模式：河南工业大学硕士学位论文ＲＧＢ模式是基于自然界中３种基色光的混合原理，将红（Ｒ）、绿（Ｇ）、蓝（Ｂ）３种基色按照从０（黑）～２５５（白）的亮度值在每个色阶中的分配，从而指定其色彩。（３）ＣＭＹＫ模式：ＣＭＹＫ颜色模式是一种印刷模式。其中ＣＭＹＫ４个字母分别指青（Ｃｙａｎ）、洋红（Ｍａｇｅｎｔａ）、品黄（Ｙｅｌｌｏｗ）、黑（Ｂｌａｃｋ），在印刷中代表４种颜色的油墨。该模式本质上与ＲＧＢ模式没有什么区别，只是产生色彩的原理不同，在ＲＯＢ模式中由光源发出的色光混合生成颜色，而在ＣＭＹＫ模式中由光线照到有不同比例Ｃ、Ｍ、Ｙ、Ｋ油墨的纸上，部分光谱被吸收后，反射到人眼的光产生颜色。（４）Ｌａｂ模式：该模式是一套国际颜色标准，该模式定义的颜色最多，Ｌ表示光照强度，ａ色调表示从深绿到灰，再到亮粉红色的光谱变化，ｂ色调表示从亮蓝到灰，再到焦黄的光谱变化。以上是真彩图象常用的几种色彩模式，其中以ＲＧＢ是最常用的显示模式，该模式和电脑显色器显示的颜色一致，而ＣＭＹＫ模式主要用于印刷打印，Ｌａｂ模式是转换颜色模式时常用的一种内部颜色模式，不常用。ＨＳＢ主要用于调色，无法取得准确地数值。因此，本实验采用ＲＧＢ模式，通过计算机图象处理软件取图像的亮度和ＲＧＢ值作为实验色度分析指标。３．３．１．３图像保存格式与扫描分辨率对测定影响常见的图片格式【ｌｏｓ］有以下几种：（１）ＹＰＧ：高效率压缩格式，用于压缩较大的真彩图，是一种压缩格式，压缩比合适，一般对图片影响不大。（２）ＧＩＦ：网络图像格式，压缩格式，主要处理２５６色彩的图像，不能处理真才图片（３）ＢＭＰ：几乎不压缩，支持各种色彩图像，但是占用的空间大（４）ＴＩＦ（ＴＩＦＦ）：支持１６００多万种色彩，图像质量高，占用的空间大，是ＪＰＧ的ｌＯ倍。由以上各种格式的特点，考虑到图像的色彩失真问题和存储的方便，本实验选用ＪＰＧ格式。本实验所用的扫描仪为平板扫描仪，按试验方法制备亚根试纸，试纸分别在亚肉类食品中亚盐检测研究根浓度为ｌｍｇ／Ｌ和５ｍｇ／Ｌ的溶液中显色，显色试纸分别选用分辨率为２００、３００、６００ｄｐｉ（每英寸的像素点数））扫描取像，然后通过计算机进行图像分析，试纸的亮度和ＲＧＢ值如下表３．１。由结果可知，扫描的分辨率对亮度值和ＲＧＢ值的影响不大，扫描分辨率的提高，只是提高了图片在显示器上的显示效果，对其色彩值的大小影响较小，而且随着分辨率的提高，图像扫描速度较慢，占用的存贮空间急速增大，给图像的获取和储存带来不便。因此，实验选用扫描分辨率２００ｄｐｉ，图像扫描速度快，存贮方便，图像的色度值稳定。表３－１分辨率对色度值的影响亚根含量扫描分辨率亮度（ｍｇ／Ｌ）（ｄｐｉ）ＲＧＢ２００２４２．３２２４９．４３２３８．２９２４４２８６００２４３．５８２５０．５９２３９．６１２４５．５３５３００２３７．６５２４５．８２２２９．３３２４５．８８６００２３８．７８２５６．５２２３０．６５２４７．０８３，３．２试纸用纸的选择试纸用纸应具有易吸附显色剂，干燥时间短，显色效果好，价格低廉等特点。本实验对各种型号的试纸材料进行了筛选，考虑到价格因素和吸附显色剂能力，试验主要对实验室常用的几种滤纸进行详细的试验比较。用各种滤纸在相同试验条件分别制作成亚盐试纸，配制浓度为ｌ、５、１０、２５、３３河南工业大学硕士学位论文５０、７５、１００、１２５ｍｇ，＇Ｌ亚根标准溶液，将各种滤纸制作的亚根试纸分别用系列亚根标准溶液进行显色，并扫描取像。通过计算机取各显色试纸Ｉ蛩像的色度值（亮度值和ＲＧＢ值）。试验选取各显色试纸图象的Ｒ值作为试验指标，Ｒ值在一定浓度范围内与亚根浓度有良好线性关系，通过线性方程的斜率可以表征色阶变化，Ｒ值的大小与试纸颜色的深浅成反比。试验结果如表３．２，由于不同材料制作的亚根试纸在各浓度点显色均平行试验３次，最后取色度平均值，因此数据量庞大，此处不再详细列出各点色度值，仅给出Ｒ值与亚根浓度线性方程的斜率和亚根浓度为１ｍｇ／Ｌ时的Ｒ值。实验结果显示，慢速定性滤纸制备的亚根试纸较其他试纸显色速度相对较快，显色更加均匀，Ｒ值变化的斜率较大，说明显色试纸具有良好的色阶；对相同浓度的亚根显色时，慢速定性滤纸制备的亚根试纸显色后的Ｒ值较大，说明显色更加灵敏。慢速定性滤纸价格低廉，是比较理想的材料，因此本实验选用慢速定性滤纸作为试验试纸材料。表３－２试纸材料的影响３．３．３显色体系及其浓度的选择３．３．３．１显色体系的选择显色体系以对氨基苯磺酸作为重氮化试剂，偶联试剂单独选用盐酸萘乙二胺，或者８．羟基喹啉，效果都不好，前者制备的试纸显色为紫色，颜色过深，后者制备的试纸显橙红色，颜色过浅，二者的颜色变化梯度都不太好。试验将二者以一定的比例混合使用，肉类食品中亚盐捡测研究取得很好的效果，制备的试纸显色色阶变化明显，因此选用二者的混合溶液为偶联试剂。３．３．３．２显色剂的最佳配比试验显色剂分为两部分，重氮化试剂Ａ对氨基苯磺酸，偶联试剂Ｂ由盐酸萘乙二胺和８．羟基喹啉混合而成。首先固定Ａ的用量，分别改变盐酸萘乙二胺和８．羟基喹啉混合体积比为２：１，１：１，２：３，１：２，１：３，固定其他试验条件，制备亚根试纸，并用系列亚根标准溶液显色，通过扫描仪成像后进行色度分析。以显色试纸的色度Ｒ值作为试验指标，Ｒ值与亚根浓度在一定范围成线性关系，通过分析其斜率的不同可以表征色阶变化大小，结果如表３．３。结果表明，当盐酸萘乙二胺和８．羟基喹啉混合体积比２：３时，Ｒ值线性方程斜率较大，检测试纸可得到较好的颜色梯度，色度Ｒ值与亚根浓度良好线性相关性。表３－３偶联试剂比例对试纸影响显色剂Ａ与Ｂ按３：１，２：１，１：１，１：２，１：３的体积比混合并分别进行实验，从色阶变化的显著性看，２：１，１：１，１：２，都可较好的显色效果和颜色梯度，用三种不同配比显色剂制备试纸，再用随机配置的亚根溶液显色，将各显色试纸颜色与亚根标准系列所显的颜色进行比较，得到不同的浓度区间。同时用国标方法测定亚浓度。结果见表３．４。河南工业大学硕士学位论文表３－４不同比例显色剂测定范围其中的精确浓度是使用国标方法‘１响测定得到的。实验结果显示，显色剂Ａ与Ｂ按１：１时是试纸所对应的浓度范围是与真实浓度符合的最好。将三种不同比例混合的显色剂制的试纸分别测定１、５、１０、２５、５０、７５、１００、１２５ｕｇ／ｍｒ，的亚根标准样品，将显色后的试纸通过扫描仪扫描为真彩图片，通过色度分析，取显色试纸各色度值，以Ｒ值作为试验指标，Ｒ值与亚根浓度在一定范围成线性关系，通过分析其斜率的不同可以表征色阶变化大小，结果如表３－５。表３－５显色剂比例不同对试纸影响由表可以看出，显色剂比例为１：１时，色阶变化明显，线性相关系数较高。由以上结果可知显色剂Ａ：Ｂ为１：１，显色效果较好，色度值与亚根浓度不仅线性肉类食品中亚盐检测研究关系较好，而且色阶变化值比较大，对定性和定量的准确度都有提高。因此确定对氨基苯磺酸（４ｇＩＬ），盐酸萘乙二胺（２ｇ／Ｌ），８－羟基喹啉（２ｇ／Ｌ）三者的最佳体积比为５：２：３。３．３．４酸性介质和酸度的影响酸性介质和酸度对显色有明显的影响，试验分别选用盐酸，磷酸，硫酸，醋酸，酒石酸等介质，其中醋酸制作的试纸有严重的粉色底色，干扰测定。硫酸对试纸有腐蚀作用，试纸不易保存。酒石酸容易在低温下析出晶体，使试纸不稳定。盐酸和磷酸介质均可获得较好的色阶，但盐酸介质制作的试纸稳定性不如磷酸试纸。因此，本实验选用磷酸作用酸性介质。固定其他试验条件，分别采用Ｏ．００１、Ｏ．０１、Ｏ．１、Ｏ．５、ｌ、１．５、２、２．５、３ｍｏｌ／Ｌ的磷酸酸化试纸，用制备的试纸分别用系列亚根标准溶液显色（１、５、１０、２５、５０、７５、１００、１２５ｒｔｇ／ｍＬ）。显色试纸通过扫描仪扫描为彩色图片，分析各点色度，测定亮度和ＲＧＢ值，以色度值与亚根浓度作图，回归为直线，得到各个色度值与亚根浓度的线性方程，其中以Ｒ值与亚根浓度线性关系最好，因此试验选用色度的Ｒ值作为指标，其斜率可以表征色阶大小，相关系数可以表征色彩值与亚根的线性关系。试验结果如下表３－６。表３－６酸度对试纸色阶的影响河南工业大学硕士学位论文由表３－６可知，随着磷酸酸度增加，色度值和亚根浓度的线性方程斜率增加，即试纸的色阶变化增加，变色更加灵敏，且色度值和亚根浓度的线性相关性增加，显色速度也有所增加，但酸浓度大于Ｏ．１ｍｏｌ／Ｌ之后，线性方程斜率开始降低，即色阶变化降低，而线性相关性变化不大，试纸的显色不稳定，综合各方面的因素，取Ｏ．１ｍｏＦＬ的磷酸作为酸性介质，此时不仅显色速度较快，颜色稳定，而且色阶变化明显，与亚根浓度有较好的线性关系。３．３．５试纸浸泡时间影响通过改变试纸在显色剂中的浸泡时间确定浸泡时间是否对显色剂的吸附量有影响，分别选取２、６、８、１０、１５、２０、３０ｒａｉｎ，在相同的其他试验条件下条件制备亚盐试纸，结果发现浸泡时间大于８ｍｉｎ后，浸泡时间对测定影响很小，此时显色剂在滤纸上的吸附已达到平衡，结合其他因素，本实验确定浸泡时间为１５３．３．６试纸干燥环境的影响湿润的试纸受到空气中氧气的氧化，可能会使试纸变质，造成一定的试验误差，因此，将制备好试纸在４０＂Ｃ条件下真空恒温干燥器中干燥，纸没有底色，试验测定效果较好。３．３．７试纸定性检测在最佳的实验条件下，建立标准参比色卡，可以定性的快速鉴定亚根的含量。标准色卡制作：配置亚根标准浓度分别为１、５、ｌＯ、２０、３０、５０、７０ｍｇ／Ｌ的溶液，用最佳实验条件下制备的亚盐试纸分别在系列标准亚硝溶液中显色，用扫描仪扫描为图片，如下图，作为标准比色卡。３０ｒａｉｎ。ｍｉｎ左右可完全干燥，试肉类食品中亚盐检测研究∞图３－１标准色阶对比卡应用亚根试纸显色后与标准色卡对比，可快速测定出亚根的大致浓度范围，作为定性的依据。３．３．８试纸定量检测显色后的试纸通过扫描仪扫描为真彩图片，通过色度分析，可以准确快速的辅助定量检测亚根的含量。３．３．８．１色度指标选择试验选用ＲＧＢ色彩模式，通过计算机图形处理软件取得显色图像的亮度和ＲＧＢ值作为试验指标。３．３．８．２标准曲线的绘制配置亚根标准溶液浓度分别为１、５、１０、２５、５０、７５、１００、１２５ｍｇ／Ｌ，用亚盐试纸分别显色，扫描为ＪＰＧ格式的真彩图片，用Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ图像软件在ＲＧＢ模式下，取各点的亮度Ｌ值及ＲＧＢ值。以亚根浓度为ｘ轴，以亮度（Ｌ）及ＲＧＢ值为Ｙ轴作图。试验结果如图３．２，亮度值Ｌ和ＲＧＢ值与亚根在１～１２５ｍｇ／Ｌ浓度范围内均有一定的线性关系。其中Ｒ值与亚根的线性关系最好，线性方程Ｙ＝一０．６１９ＣＮｏ，。（ｒａｇ／Ｌ）河南工业大学硕士学位论文＋２４８．６９，相关系数ｒ＝０．９９８６，相对标准偏差１．５５％。２６０２４０２２０２００划１８０蜊和１６０１４０１２０１００８００２０４０６０８０１００１２０１４０ｃＮｏ，Ｉｍ鳓图３－２亚根标准曲线注：一Ｒ值，·Ｂ值，◆Ｌ值，▲Ｇ值３．３．９试纸稳定性试验在低温避光条件下保存试纸，选择保存时间一周，二周，三周，一个月，二个月，三个月，进行对比试验，分别用浓度为１ｍｇ／Ｌ、５ｍｇ／Ｌ、１０ｍｇ，Ｌ的亚根标准溶液对不同保存时间的亚根试纸显色，取色度Ｒ值对比，结果如表３—７。结果显示，在低温避光条件下保存的试纸，对同浓度亚根显色，显色试纸的色度Ｒ值变化很小，即其检测性能保持稳定，显色效果良好。表３—７避光保存试纸肉类食品中亚盐检测研究３．３．１０干扰离子按实验方法制备试纸，进行离子干扰试验，考察了常见的阴阳离子对浓度为５ｍｇ／ＬＮ０２－的干扰情况，结果表明，相对误差在士５％以内，１５００倍的Ｋ＋、Ｎａ＋、ｃａ：２＋、Ｍ，＋、ＮＩ－ｈ＋、Ｃ１一、Ｎ０３一、Ｃ０３２．、ｓｏ？一，Ｐ０４３一、１０００倍的廿＋、Ｐｂ２＋、ｃｄ２＋、Ｆ一、Ａｅ一、Ｃ０３２一、Ｂｒ一、Ｉ一，５００倍的Ｃｕ２＋、Ｍｎ２＋、Ｓ２－，１００倍的Ｂａ２＋、Ｚｎ２＋，５０倍的Ｆｅ３＋不干扰测定。３．４样品测定称取５．０００ｇ绞碎的肉制品于５０ｍＬ烧杯中，依据国家标准处理样品ｎ０５～０６１，吸取适量滤液于５０ｍＬ容量瓶中，然后根据实验方法用试验制备的亚盐试纸测定亚盐含量，并与国标法【１０６１测定结果对照，结果如表３．８。表３－８肉类样品中Ｎ０２一分析结果（ｎ－８）４１河南工业大学硕士学位论文３．５本章小结本实验选用普通慢速定性滤纸为试纸材料，以磷酸酸化试纸，重氮化试剂选用对氨基苯磺酸，偶联试剂选用盐酸萘乙二胺和８一羟基喹啉复合体系。将显色试纸通过扫描仪成像，使用计算机对图象进行色度分析，优化试纸制备条件，得到试纸制备的最佳条件为：滤纸首先在Ｏ．１ｍｏｌ／Ｌ的磷酸中酸化，然后在对氨基苯磺酸（４ｇ／Ｌ），盐酸萘乙二胺（２ｇ／Ｌ），８－羟基喹啉（２班）的混合溶液体系浸泡１５ｍｉｌｌ，三者体积比为５：２：３，然后放入真空干燥器４０℃条件下干燥后，避光保存。通过建立标准参比色卡，运用该试纸可以定性的快速鉴定亚根的大致含量范围。将显色后的试纸通过家用扫描仪扫描为图片，通过色度分析，其色度Ｒ值与亚根浓度由较好的线性关系，由线性方程Ｙ＝．Ｏ．６１９Ｃ（ＮＯｉ）＋２４８．６９可快速准确地测定出样品中亚盐的含量，其中Ｎ０２＂浓度单位ｍｇ／Ｌ。该试纸应用于肉类食品亚根的检测，效果满意。肉类食品中亚盐检测研究第四章结论（１）基于亚根在硫酸介质中强烈催化溴酸钾氧化甲基橙反应的原理，运用电化学工作站，研究了甲基橙在悬汞电极上的电化学行为，运用导数线性扫描伏安法跟踪反应中甲基橙二阶导数峰电流的变化来测定亚根浓度，建立起一种新的测定亚根浓度的方法。最佳实验条件为：２ｘ１０４ｍｏｌ／Ｌ甲基橙溶液用量１．５ｍＬ；５×１０之ｍｏｌ／Ｌ溴酸钾溶液用量Ｏ．８ｍＬ；Ｏ．５０ｍｏｌ／ＬＨ２Ｓ０４溶液用量Ｏ．５ｍＬ；２．０ｍｏｌ／Ｌ的氨水溶液用量３．０ｍＬ；起始电位一０．３０Ｖ，扫描速率１００ｍＶ／ｓ，静止时间６Ｓ。在．５４０ｍＶ获得甲基橙二阶导数电流峰，分别测量试样溶液峰电流（Ｉ）及空白溶液峰电流（１０），计算△Ｉ－Ｉ—Ｉｏ。该方法在室温下进行，操作方便，样品溶液不受颜色。试验条件经过优化，在选择的最佳试验条件下，标准曲线的回归方程为△Ｉ－５．８０７ＣＮ０２－（ｍｇ·Ｌｄ卜０．２９５２，相关系数ｒ＝０．９９８２，检测限为１．０５ｘｌ驴ｇ／Ｌ，线性范围２．３ｘ１０击～５．３ｘ１０４ｇ／Ｌ。测定肉制品中亚根的回收率在９７％～９９％之间，结果满意。（２）选用普通慢速定性滤纸作为试纸材料制作了新型亚根快速测定试纸，试纸以磷酸酸为酸性介质，对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺和８．羟基喹啉复合体系为显色剂。试验将制备的试纸显色后，通过扫描仪成像，由色度分析结果进行试验条件优化，得到制备亚盐试纸的最佳试验条件：滤纸首先在Ｏ．１ｍｏｌ／Ｌ的磷酸中酸化，然后在对氨基苯磺酸（４ｇ／Ｌ），盐酸萘乙二胺（２ｇ／Ｌ），８－羟基喹啉（２ｇ／Ｌ）的混合溶液体系浸泡１５ｍｉｎ，三者体积比为５：２：３，然后放入真空干燥器干燥后，避光保存，可用于亚根的快速定性定量检测。该试纸应用于肉类食品亚根的检测，效果满意。河南工业大学硕士学位论文参考文献【１】Ｆｏｏｄａｄｄｉｔｉｖｅｓａｒｉｄｐｕｂｌｉｃｈｅａｌｔｈｉｎ：ＧｕｎｔｈｅｒＥＨａｍｒｎｅｒ，Ｋａｒｌ．ＯｔｔｏＨｏｎｉｋｅｌ，ｅｄｓ．Ｆｏｏｄｄｕｒｉｎｇｆｏｏｄｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ／Ｆｏｏｄｓａｆｅｔｙａｓｓｕｒａｎｃｅａｎｄｖｅｔｅｒｉｎａｒｙｐｕｂｌｉｃａｓｓｕｒａｎｃｅｈｅａｌｔｌｌ［ｑ．２００４，３１７—３２９．【２】宋华宾．动物性食品中亚盐检测方法研究现状【Ｊ】．肉品卫生，１９９４，１０：２８．【３】吴小春，吴友谊．环境水样及食品中亚根的分析进展阴．分析测试技术与仪器，２００３，９（４）：２２７．【４】ＡｓｈｒａｆＡＭ，ＭｏｈａｒｎｅｄＦＣａｔａｌｙｔｉｃＥｆｆｅｃｔ８９．ｏｎＥ，ＴｓｕｔｏｍｕＦ，ｅｔａ１．ＳｅｎｓｉｔｉｖｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｔｒｉｔｅｕｓｉｎｇＩｔｓｔｈｅＢｒｏｍａｔｅＯｘｉｄａｔｉｏｎｏｆＰｒｏｃｈｌｏｒｐｅｒａｚｉｎｅ田．Ａｎａｌｙｓｔ，１９９６，１２１（１）：【５】王瑜．动力学催化光度法测定痕量亚根［Ｊ】．理化检验：化学分册，２００５，４１（８）：５６１－５６２，５６８．【６］ＪａｍｓｈｉｄＬＭａｎｚｏｏｒｉ，ＭｏｈａｍｍａｄＨ．Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅｂａｓｅｄｉｔｓｃａｔａｌｙｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆｃａｒｍｉｎｉｃａｃｉｄｂｙｂｒｏｍａｔｅ忉．Ｔａｌａｎｔａ，１９９８，４６（６）：１３７９－１３８６．【７】姜华，何荣桓，修明磊，等．反相离子对色谱法同时测定水中的根和亚根册．分析化学，２００１，２９（７）：８６７—８６７．［８】陈金枝，韩铁．水样中亚盐的高效液相色谱测定法阴．环境与健康杂志，２００２，１９（３）：２５６－２５７．【９】高岐，张海燕．化学发光分析法测定食品中微量亚根叨．理化检验，化学分册．２００３，３９（９）：５１５—５１６，５１．（１０】ＥｍａｆｉＡＡ，ＫｏｌａｇａｒＭＳ．ＣａｔａｌｙｔｉｃＫｉｎｅｔｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＵｌｔｒａｔｒａｃｅＡｍｏｕｎｔｓｏｆＮｉｔｒｉｔｅ诵ｍ２８：１２４５．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｂｙＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌＰｕｌｓｅＰｏｌａｒｏｇｒａｐｈｉｃＭｅｔｈｏｄ【Ｊ】．ＡｎａｌＬｅｔｔ，１９９５，【１１】ＥｎｓａｆｉＡＡ，ＮａｇｈｉｚａｄｅｈＭＪ．ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＲｅａｃｔｉｏｎＲａｔｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｔｒｉｔｅＩｓｌａｍｉｃｂｙＣａｔａｌｙｔｉｃＡｃｔｉｏｎｏｎＮｉｌｅＢｌｕｅＡＢｒｏｍａｔｅＲｅａｃｔｉｏｎ明．ＳｃｉＲｅｐｕｂ，１９９５，６（４）：２１５．［１２】李贵荣，王永生，刘传湘．催化光度法测定痕量亚根的研究【Ｊ】．环境保护，１９９４，１２：２３．【１３】李贵荣．溴酸钾氧化茜素红催化光度法测定痕量亚根［Ｊ】．化学世界，１９９５，４４肉类食品中亚盐检测研究１１：５９７．【１４】李贵荣，王永生．催化光度法分析水样中亚根［Ｊ】．卫生研究，１９９６，２５（５）：２９４．［１５】李贵荣．溴酸钾氧化酚红催化光度法测定亚根阴．环境保护，１９９６，２５（５）：２９４．【１６】ｉｆ．ｉｆ＿清．测定亚根的表面活性剂增敏催化动力学光度法川．分析测试学报，１９９８，１７（６）：７８．【１７】张爱梅．表面活性剂增敏催化光度法测定痕量亚根［Ｊ】．分析化学，２００１，２９（２）：２０２．【１８】刘长增．锌试剂一Ｎ０２＂一ＫＢｒ０３催化体系测定痕量亚根叽．光谱学与光谱分析２００３，２３（２）：３８４．【１９】訾言勤，凌程凤．四波长负吸收催化光度法测定痕量亚根【Ｊ】．分析化学，２００４，３２（８）：１０３９．［２０】郑肇生，吴舜口舟．测定亚根的新指示反应研究：氯酸钾一考马斯亮蓝Ｇ体系［Ｊ】．分析化学，１９９５，２３（３）：３０６．【２１】ＯｋｕｔａｍｉＴ，ＳａｋｕｒａｇａｗａＡ，Ｋａｍｉｋｕｒａ，ｅｔＮｉｔｒｉｔｅＢａｓｅｄｏｎａ１．ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＩｔｓＣａｔａｌｙｔｉｃＥＲｅｃｔＯｆｔｈｅＯｘｉｄａｔｉｏｎｏｆ２，２＇－ａｚｉｎｏｂｉｓ０一ｅｔｈｙｔｂｅｎｚｏｔｈｉａｚｏｌｉｎｅ一６·ｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄ）叨．ＡｎａｌＳｃｉ，１９９７，７（５）：７９３．［２２】刘金霞，何新亚，叶英植．氯酸钾氧化亮甲酚蓝催化光度法测定痕量亚根【Ｊ】．郑州大学学报（自然科学版），１９９６，２８（３）：９２．【２３】陈文山，徐茂田．催化光度法测定痕量亚根阴．海南医学院学报，１９９８，ｌ（４）：４．【２４】ａｉｎｇＬ，ＭａｓａａｋｉＩ’ＴｓｕｔｏｍｕＥＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＮｉｔｒｉｍｃａｔａｌｙｚｅｄＯｘｉｄａｔｉｏｎＵｓｅｄｏｆＣｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅｗｉｔｈＨｙｄｒｏｇｅｎＰｅｒｏｘｉｄｅａｎｄ／ｏｒＤｉｓｓｏｌｖｅｄＯｘｙｇｅｎＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｔｒｉｔｅ阴．Ａｎａｌｙｓｔ，１９９５，１２０：５４３．ｆｏｒｔｈｅ【２５】李莉芝，王桂芝．催化分光光度法测定水中微量亚盐【Ｊ】．无机盐工业，１９９８，３０（４）：３８．［２６】孙彩兰，姜瑞民．新体系催化动力学光度法测定痕量亚根【Ｊ】．分析试验室，２００１，２０（２）：３４．［２７】申双龙，晨小霞，靳永胜．过氧化氢一亚甲蓝动力学光度法测定亚根【Ｊ】．分析化学，２００２，３０（１１）：１４０５．【２８】赵登山，钱运华．新体系过氧化氢．中性红催化光度法测定亚根【Ｊ】．淮阴工学院学报，２００３，１２（５）：１１．［２９】ＪｉａｎｇＭ，ＪｉａｎｇＦ’ＤｕａｎＪ，ｅｔａ１．ＳｌｚｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｆｉｏｎＢａｓｅｄ０１１ｏｆＮｉｔｒｉｔｅｔｈｅＯｘｉｄａｔｉｏｎｏｆＴｈｉｏｎｉｎｅｂｙＰｏｔａｓｓｉｕｍＢｒｏｍａｔｅ［Ｊ】．ＡｎａｌＣｈｅｍＡｅｔａ，１９９０，河南工业大学硕士学位论文２３４（２）：４０３．【３０］ＥｎｓａｆｉＡ气ＲｅｚａｉｉＣａｔａｌｙｔｉｃＥｆｆｅｃｔＯｌｌＢ．Ｋｉｎｅｔｉｃ－ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｉｒｉｔｃｂｙＩｔｓｔｈｅＯｘｉｄａｔｉｏｎｏｆＢｒｉｌｌｉａｎｔＣｒｅｓｙｌＢｌｕｅｂｙＢｒｏｍａｔｅ阴．ＡｎａｌＣｈｅｍＡｃｔａ，１９９４，５０（２）：１６９．［３ｌ】ＪａｍｓｈｉｄＢａｓｅｄｏｎＬＭ＇ＭｏｈａｍｍａｄＨＳ，Ａｌｌ０１１ＭＨ．ＳｐｅｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｔｒｉｔｅＩｔｓＣａｔａｌｙｔｉｃＥｆｆｅｃｔｔｈｅＯｘｉｄａｔｉｏｎｏｆＣａｒｍｉｎｉｃＡｃｉｄｂｙＢｒｏｍａｔｅ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，１９９８，４６：１３７９．［３２】ＥｎｓａｆｉＮｉｔｒｉｔｅＡＡ，ＳａｍｉｍｉｆａｒＭ．Ｋｉｎｅｔｉｃ．ＳｐｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｃａｙｔｉｃＲｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＰｙｒｏｇａｌｌｏｌＲｅｄａｎｄｏｆＬｏｗＬｅｖｅｌｓｏｆｂｙＢｒｏｍａｔｅ阴．Ｔａｌａｎｔａ，１９９３，４０（９）：１３７５．［３３】ＫｈａｓｋｈａｌｉＡＡ，ＭａｓｔｏｉＧＭ．ＡｎｓａｎＩ气ｅｔａ１．ＫｉｎｅｔｉｃＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓｏｆＮｉｔｒｉｔｅｂｙＢｒｏｍｏｐｙｒｏｇａｌｌｏｌＲｅｄ【Ｊ】．１９９７，１９（２）：１１８．【３４】ＡｔｋｈａｍｉＡ，ＪａｌａｌｉＢａｓｅｄａｎＥＳｐｅｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴｒａｃｅＡｍｏｕｎｔｓｏｆＮｉｔｒｉｔｅｏｎＩｔｓＣａｔａｌｙｔｉｃＥｆｆｅｃｔｔｈｅＴｈｙｍｏｌＢｌｕｅ·ＢｒｏｍａｔｅＲｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＭｉｅｒｏｃｈｅｍＪ，１９９７，５７（２）：２４．【３５】孙爱玲，刘道杰．溴连苯三酚红体系催化光度法测定亚根的研究阴．分析试验室，１９９６．１５（２）：５６．【３６】ＺｈａｎｇＸ．，ＷａｎｇｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＨ．，ＦｕＮＮ．，ｅｔａ１．Ａｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｎｉｕｉｔｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇｍｅｔｈｏｄａｎｄｆｏｒｔｈｅｗｉｔｈｒｈｏｄａｍｉｎｅｌ１０川．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ，２００３，５９：１６６７—１６７２．【３７］ＮｉａｎｑｉｎＪｉｅ，ＯｕａｎｌｉｎｇＹａｎｇ，Ｑｕｉｂｉｎ，ｅｔａ１．ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＱｕｅｎｃｈｉｎｇＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｉｔｒｉｔｅｗｉｔｈＩｎｄｏｌｅ：［Ｊ】．Ｍｉｃｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ／ｏｕｍａｌ，１９９９，６２（３）：３７１—３７６．【３８】董存智．罗丹明３Ｇｏ荧光猝灭法测定微量亚根们．分析化学，２００２，３０（１１）：３４０７．【３９】冯素玲，唐安娜，樊静．荧光分析法测定痕量亚根［Ｊ】．分析试验室，２００１，２０（２）：４１．［４０】董存智．藏红Ｔ荧光熄灭法测定痕量亚根叨．光谱学与光谱分析，２００３，２３（１）：１７０．【４１】韩志辉，吕昌银．吖啶红荧光猝灭法测定痕量亚根阴．中国卫生检验杂志，２００４，１４（３）：２８７．【４２】鲍所言，刘卫洁，胡汉芳．催化荧光法测定痕量亚根川．光谱学与光谱分析，２００４，２４（３）：３４２．［４３】陈兰化，陈红旗．动力学荧光法测定痕量亚根的研究朔．淮北煤炭师范学院学报：自然科学版，２００４，２５（１）２１．肉类食品中亚盐检测研究【４４】Ｃ．一Ｘ．Ｊｉａｏ，Ｃ．一ｔ２Ｎｉｕ，Ｓ．－Ｙ．Ｈｕａｎ，ｅｔ．ａ１．Ａｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇｏｆａｃａｒｂａｚｏｌｅｃｈｅｍｏｓｅｎｓｏｒｆｏｒｎｉｔｒｉｔｅｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ；明．Ｔａｌａｎｔａ，２００４，６４：６３７—６４４．【４５】王克太，陈国兴，胡之德．催化动力学流动注射荧光光度法测定微量亚根【Ｊ】．分析实验室，１９９７，１６（１）：２６．［４６】李建国，王耀荣．碘化物．罗丹明Ｂ体系荧光猝灭反应测定痕量亚根［ｆ１．分析化学，１９９７，２５（５）：５００．【４７】朱展才，许文伟，汪静．氧化还原荧光法测定痕量亚根川．分析化学，２００１，２９（８）：９４１．［４８１（：ｈｅｎＨ，ＡｎＴＣ，ＪｉｎＸＬ，ｅｔａ１．Ｆｌｏｗ－ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｃａｔａｌｙｔｉｃｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｃｅａｍｏｕｎｔｓｏｆｎｉｔｒｉｔｅ明．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＬｅｔｔｅｒｓ，１９９９，３２（１４）：２８８７—２８９７．ｃａｔａｌｙｔｉｃｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ［４９】ＺｈａｎｇＺｈｉ—ｑｉ，ＧａｏＬｏｕ－ｊｕｎ，ＺｈａｎＨａｎｙａｎｇ．Ｆｌｏｗ－甸ｅｃｔｉｏｎｄｅｔｅｒｍｉｎｍｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅｕｓｉｎｇｔｈｅｒｅｄｏｘｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｎａｐｈｔｈｏｌｇｒｅｅｎＢａｎｄｐｏｔａｓｓｉｕｍｂｒｏｍａｔｅｊ［Ｊ１．Ｔａｌａｎｔａ，１９９８，４７（２）：４９７—５０１．Ｇｕｅｒｒｅｒｏ，Ｃ．ＧｏｍｅｚＢｅｎｉｔｏ．【５０】Ｒ．ＳｅｇａｒｒａＭａｒｔｉｎｅｚＣａｌａｔａｙｕｄ．Ｆｌｏｗ－两ｅｃｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ—ｓｐｅｅｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅａｎｄｎｉｔｒａｔｅｉｎｗａｔｅｒｒｅａｃｔｉｏｎｗｉｔｈｓａｍｐｌｅｓｂｙｐｒｏｆｌａｖｉｎ叨．Ｔａｌａｎｔａ，１９９６，４３（２）：２３９－２４６．［５１】Ｍ．Ｊ．Ａｈｍｅｄ．Ｃ．Ｄ．Ｓｔａｌｉｋａｓ，Ｓ．Ｍ．Ｔｚｏｕｗａｒａ－Ｋａｒａｙａｎｎｉ，Ｍ．Ｉ．Ｋａｒａｙａｎｎｉｓ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅａｎｄｎｉｔｒａｔｅｂｙｆｌｏｗ－ｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ田．Ｔａｌａｎｔａ，１９９６，４３（７）：１９４３—１９５５．［５２】龚正君，章竹君．流动注射化学发光法监测环境水中的亚盐阴．西南交通大学学报，２００３．３８（４）：４９１．［５３】ＺｉＹａｈ—ｑｉｎ，ＤｕａｎＬａｎ－ｌａｎ，Ｌｕｃｈｕｎ－ｌｉｎｇ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｃｅｎｉｔｒｉｔｅｂｙｆｌｏｗ蝎ｉｅｃｔｉｏｎ－ｅａｔａｌｙｔｉｅｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ［Ｊ】．ＡｎａｌＣｈｅｍ，２００１，２９（２）：１８６．【５４】訾言勤，谢松民．反相流动注射催化光度法测定亚根［Ｊ】．理化检验：化学分册，２００２，３８（９）：４５０．【５５】魏显有．亚根一巯基乙酸—钴（Ⅱ）络合物的极谱吸附波研究叭．分析化学，１９９８，２６（５）：５４８—５５１．［５６】ＬｉＱ，ＺｈａｎＴ，ＬｕｏＹＳｏｎｇＤＮ，ｅｔａ１．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅｉｎｆｏｏｄｓｂｙｓｉｎｇｌｅ－ｓｗｅｅｐｐｏｌａｒｏｇｒａｐｈｙ．ＪｏｕｒｎａｌＯｆＡＯＡＣＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２００２，８５（２）：４５６·４５９．【５７］李建平，屈优优，魏小平．甲基橙亚硝化极谱法测定亚根哪．分析试验室，２００１，２０（３）：６０·６２．［５８】谢莉，吕ｇＪ４＂．基于亚硝化反应吖啶红极谱法测定亚根川．理化检验：化学分４７河南工业大学硕士学位论文册，２０００，３６（７）：２８９·２９０，２９３．［５９】ＤｅｎｇＹｕ－ｆａｎｇ，ＱｉｕＨ吼Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｐｏｌａｒｏｇｒａｐｈｉｃａｎｄｉｔｓａｄｓｏｒｐｔｉｖｅｗａｖｅｏｆｐ－ｒｏｓａｎｉｌｉｎｅ－８一ｈｙｄｒｏｘｙｑｕｉｎｏｌｉｎｅ—ｎｉｔｒｉｔｅｓｙｓｔｅｍａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ［－ｑ．１９９４，１３（３）：５５—５６，６４．【６０】朱明霞，车文实，姜俊峰，等．极谱法测定痕量亚根．高师理科学刊叨．２００１，２１（１）：４２－４３．【６ｌ】姚磊明，陆光汉．环境水体中亚根的极谱测定【Ｊ】．培训与研究：湖北教育学院学报，２００１。１８（２）：３３．３６．【６２】孙成均，周客．示波极谱法测定血清和组织中的亚盐叨．华西医科大学学报，１９９９，３０（２）：２２２－２２４．【６３】聂发玉．肉制品中亚盐的极谱测定【Ｊ】Ｉ中南民族学院学报：自然科学版，１９９６，１５（２）：２５－２８．［６４】李琼，奚旦立，陆光汉，等．单扫描示波板谱法测定香肠中的亚盐叨．食品研究与开发，２００６。２７（２）：１０６－１０８．［６５】王良玉，张子红，王术皓，等．催化动力学极谱法测定痕量亚根明．理化检验：化学分册，２００３，３９（２）：１０８—１０９，１１１．【６６】ＣｈｅｒｔＹｕｎ－Ｓｈｅｎｇ，ＺｉＹａｎ－ｑｉｎ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｃｅｎｉｔｒｉｔｅｂｙｃａｔａｌｙｔｉｃｋｉｎｅｔｉｃｓｏｓｃｉｌｌｏｐｏｌａｒｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＭｏｄｅｍＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，２０００（２）：５２—５３．【６７】李利军，陈相，何品刚，等．Ｎ０２一催化鸡冠花红褪色反应极谱法研究及其应用【Ｊ】．华东师范大学学报：自然科学版，２００１（ｉ）：５６．６０．［６８］张业明，黄翠花．极谱催化波法测定痕量亚根的研究［Ｊ】．环境科学与技术，２００１，２４（５）：３４·３５．【６９］杨丽珠，李永，刘炜，等．亚根的极谱测定明．分析科学学报，２００６，２２（２）：２３９—２４０．【７０】鹏图治，王国顺．分析化学手册（第四分册）：电分析化学［Ｍ】．北京：化学工业出版社，１９９９：２０１．【７ｌ】曾子文，崔文升．离子选择性电极法同时测定根和亚根【Ｊ】．离子选择电极通讯，１９８４（４）：６５．（７２】ＨｕａｎｇＣｈａｉ—ｈａｉ，ＹａｎｇＬｉ－ｊｕａｎ．Ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｍｍｏｎｉｕｍｎｉｌｒａｔｅ，ｎｉｔｒｉｔｅａｎｄｂｙｔｈｅｎｉｔｒａｔｅｅｌｅｃｔｒｏｄｅ［Ｊ］．ａｎａｌｙｔｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，１９９０，９（５１）：３４—３６．【７３】秦汉明，王瑞敏．用根电极同时测定根和亚根［Ｊ】．江汉大学学报，２０００，１“３）：１－３，２０．肉类食品中亚盐检测研究［７４】刘金霞，程伟，孙炳耀．溴酸钾．碘离子体系催化动力学电位法测定痕量亚根叨．中山大学学报：自然科学版，２００２，４１（５）：１２１．１２３．［７５１赖晓绮，黄承玲，薛君，等．催化动力学电位法测定痕量亚根阴．分析科学学报，２００２，１８（４）：２９４．２９６．【７６】陈铭，王立涛．催化电位法测定环境水样中痕量亚根的研究叨．福建分析测试，２００３，１２（１）：１６９２．１６９３．【７７】胡卫平，董学芝，何智娟．甲基紫电极催化动力学电位法测定亚根叨．分析化学，２００４，３２（６）：７６５．７６８．［７８】ＬｉＧｕｉ—ｒａｎｇ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｔｒｉｔｅｂｙｃａｔａｌｙｔｉｃｐｏｔｅｎｔｉｏｍｅｌｒｉｃｍｅｔｈｏｄｕｓｉｎｇｃｒｙｓｔａｌｖｉｏｌｅｔｓｅｌｅｃｔｉｖｅｅｌｅｃｔｒｏｄｅ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｃａｌＴｅｓｔｉｎｇａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓＰａｒｔＢＣｈｅｍｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，１９９９，３５（５）：２０７－２１０．【７９】李贵荣，王永生．催化电位法测定痕量亚根的研究川．中华预防医学杂志，１９９８，３２（１）：４５－４６．【８０】董绍俊，车光礼，谢远武，等．化学修饰电极［Ｍ】．北京：科学出版社，２００３：ｌ，８．［８１】汪云，周东美．亚甲紫的电化学聚合和亚根的电催化还原【Ｊ］．高等学校化学学报，１９９７，１８（６）：８６４．８６８．【８２】王瑜，孙元喜．聚中性红膜修饰电极测定痕量ｒＮ０２一的研究【Ｊ】．分析试验室，１９９８，１７（６）：１０—１３．【８３］ＪｉａｏＫｕｉ，ＬｕｏＸｉ·ｌｉａａｇ，ＳｕｎＷｅｉ，ｅｔａ１．．ＥｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｐｏｌｙ（ａｚｕｒｅ舢ｏｆｆｉｌｍ－ｍｏｄｉｆｉｅｄｅｌｅｃｔｒｏｄｅａｎｄｉｔｓｅｌｅｃｔｒｏｃａｔａｌｙｔｉｃｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆＩｎｓｔｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，２００２，２１（３）：４—６．ｎｉｔｒｉｔｅ川．Ｊｏｕｒｎａｌ［８４】杨秋霞，李国宝，刘祥兵，等．聚灿烂甲酚蓝修饰电极的制备及电催化作用田．济南大学学报：自然科学版，２００５，１９（３）：２１ｌ－１４．［８５】李佳，徐金瑞，孙向英，等．壳聚糖共价键合化学修饰电极测定亚根【Ｊ】．分析化学，２００２，３０（２）：２０６．２０９．【８６】连惠婷，孙向英，徐金瑞，等．Ｎ０２一在维生素Ｂ１２修饰电极上催化氧化叨．华侨大学学报：自然科学版，２００１，２２（４）：３６６．３７０．［８７］兰雁华，陆光汉．甲壳素修饰碳糊电极测定亚根［坷．分析试验室，１９９９，１８（１）：２７—３０．【８８】黄杉生，陶菡．Ｐ２Ｗ１８杂多酸－萘胺修饰电极研制及应用【Ｊ】．分析测试学报，２０００，１９（３）：６６－６７．［８９】吴呜虎，王升富．磷钼钒杂多酸．聚吡咯膜修饰电极测定污水中亚根叨．理化河南工业大学硕士学位论文检验：化学分册，２０００，３６（６）：２４４－２４５，２４９．【９０】段德良，王宅中，顾永万，等．铱取代Ｄａｗｓｏｎ型钨磷杂多酸聚吡咯薄膜修饰电极的制备及其电化学挂能［Ｊ】．化学传感器，２００１，２１（４）：４２．５０．［９１】ＤｕａｎＤｅ·ｌｉａｎｇ，ＷａｎｇＺｈａｉ—ｚｈｏｎｇ，ＺｈｏｕＳｈｉ—ｐｉｎｇ，ｅｔａ１．．ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＬａｎｔｈａｎｕｍ（ＩＩＩ）ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｈｅｐｔａｄｅｃａｔｕｎｇｓｔｏｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｐｏｌｙｐｙｒｒｏｌｅｆｉｌｍｍｏｄｉｆｉｅｄｅｌｅｃｔｒｏｄｅａｎｄｉｔｓｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｙ叨．ＡｎａｌＣｈｅｍ，２００１，２９（６）：６７９－６８１．［９２】ＤｕａｎＤｅ—ｌｉａｎｇ，ＷａｎｇＺｈａｌ—ｚｈｏｎｇ，Ｇ－ｕＹｏｎｇ—ｗａｎ，ｅｔａ１．．ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＰａｌｌａｄｉｕｍ（ＩＩ）ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄｈｅｐｔａｄｅｃａｔｕｎｇｓｔｏｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｐｏｌｙｐｙｒｒｏｌｅｆｉｌｍｍｏｄｉｆｉｅｄｅｌｅｃｔｒｏｄｅａｎｄｉｔｓｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｙ【Ｊ】．ＪｏｕｍａｌｏｆＹｕｎｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００１，２３（６）：４４７－４５３．［９３】孙向荚，刘斌，徐金瑞，等．金属杂多酸聚吡咯修饰电极的制备及应用们．华侨大学学报：自然科学版，２００１，２２（３）：２６４．２６７．【９４】翟剩勇，刘建允，金永东，等．钒取代Ｋｅｇｇｉｎ＿型杂多酸的多层组装和电催化性能研究阴．高等学校化学学报，２００３，２４（６）：９９２—９９５．［９５】趟ｉＡＥｎｓａｆｉ，ＫａｚｅｍｚａｄｅｈＡ．Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｎｉｔｒｉｔｅｗｉｔｈｏｐｔｉｃａｌｓｅｎｓｉｎｇｆｉｌｍ明．ＭｉｃｒｏｃｈｅｍｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ，２００２，７２（２）：１９３－１９９．【９６】ＩｂｒａｈｉｍＨＡＢａｄｒ．Ｎｉｔｒｉｔｅ—ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｏｐｔｉｃａｌｓｅｎｓｏｒｓｂａｓｅｄｏｎｏｒｇａｎｏｐａｌｌａｄｌｕｍｉｏｎｏｐｂｏｒｅｓｏｆｍｉｃｒｏｂｉａｌ闭．ＡｎａｌＬｅｔｔ．，２００１，３４（１２）：２０１９—２０３４．【９７】ＲｅｓｈｅｆｉｌｏｖＡＮ．Ｔｈｅｎｉｔｒｉｔｅｏｘｉｄｉｚｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｎｔｒｏｂａｅｔｅｒｓｔｒａｉｎｓ髂ａｂａｓｅｂｉｏｓｅｎｓｏｒｆｏｒｎｉｔｒｉｔｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎ叨．ＡｎａｌＬｅｔｔ．，２０００，３３（１）：２９－４２．【９８】李于善．测定亚根的电位型漆酚树脂传感器研究叨．化学世界，２０００，４１（４）：２１４—２１７，２２０．【９９］ＫｉｓｓｉｎｇｅｒＰＴ，ＨｅｉｎｅｉｍａｎＷＲ．ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＮｅｗＹｏｒｋ：ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｉｎｅｌｅｃｔｒｏａｎａｌｙｔｉｃａｌｃｈｅｍｉｓｔｒｙ叨．ｌｎｅ，１９９６，２３（７）：７３９．［１００】高志强，蔡青云，姚守拙．利用压电频移法测定水中的亚根叨．分析化学，１９９８，２６（２）：１７７－１７９．【１０１】朱岩，岳伟民．离子色谱法（紫外检测）测定肉制品中的根扣亚硝亚根叽．色谱，１９９１，９６：３９２．【１０２】辛梅华，徐金瑞．反相离子对色谱法一电化学检测测定亚根、硫氰酸根，苯胺叨．分析化学，１９９３，２１（１２）：１４４２．【１０３】梁镰銮，吴奇藩．低压离子色谱测定地面水中的Ｆ，Ｎ０２一，Ｎ０３‘离子叨冲国环境监测，１９９５，１１（２）：１８．［１０４】夏正斌，梁镰銮．低压离子色谱一流动注射吸光光度法连续测定水中氮的化合物肉类食品中亚盐检测研究［Ｊ】．理化检验：化学分册，２００１，３７（７）：３２１．【１０５】ＧＢ／Ｔ５００９．１－２００３．食品卫生检验方．法［ｓ】．北京：国家标准局，２００３．［１０６】ＧＢｆｒ５００９．３３—２００３．食品中亚盐与盐的测定［ｓ】．北京：国家标准局，２００３．［１０Ｗ］康耀红．计算机图形图象处理【Ｍ】．北京：北京大学出版社，２００２：９８．［１０８】沈大林．Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ７．Ｏ中文版案例教程【￣ｑ．北京：中国铁道出版社，２００３：６６．５１河南工业大学硕士学位论文致谢本论文的全部工作是在展老师的精心指导下完成的，他对我的学习和生活给予了无微不至的关怀，付出了巨大的心血和汗水，同时在怎样做人方面，展老师给我作出了终生难忘的表率作用，在此我对展老师表示由衷的感谢。本论文系河南省科技攻关食品安全关键技术的课题，感谢项目对本论文资助！此外，对在我完成论文期问给予我巨大支持的家人和朋友，以及无私帮助和指导过我的老师和同学表示诚挚的谢意！肉类食品中亚盐检测研究个人简历１．个人基本情况姓名：郭昌山专业：应用化学硕士论文课题：性别：男民族：汉籍贯：河南开封研究方向：现代分离与分析技术肉类食品中亚盐检测研究２．已发表论文电化学传感器测定食品中亚盐的研究进展，肉类研究，２００６．１０电化学分析法测定食品中亚根的研究进展，食品研究与开发，２００７．３