维普资讯 http://www.cqvip.com
医科大学学报ＪＯＵＲＮＡＩ ＯＦ ＸＩＮＪＩＡＮＧ ＭＥＤＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ２００６ Ｊａｎ．，２９（１） ７１ ＨＰＬＣ—ＥＬＳＤ法测定甘草浸膏中的蔗糖含量 陶 虹，陈冬云，马晓康 （维吾尔自治区药品检验所，乌鲁木齐８３０００２） 中图分类号：Ｒ９２７．２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００９—５５５１（２００６）０１—００７１＿０１ 甘草浸膏为化痰止咳的常用配伍药，浸膏中除含有甘草 酸外还含有多种糖类成分，其中蔗糖是重要的一种，但目前 仅以测定甘草酸的含量来控制其质量。为全面控制甘草浸 膏的质量，建立甘草浸膏中蔗糖含量的测定方法，本文应用 高效液相色谱一蒸发光散射检测（ＨＰＩ Ｃ—ＥＬＳＤ）法［１＿测定蔗 糖含量，现报道如下。 １仪器与试剂 １．１仪器 高效液相色谱仪（ｗａｔｅｒｓ １５２５ Ｂｉｎａｒｙ ＨＰＩ Ｃ 泵、ｗａｔｅｒｓ ７１７ ｐｌｕｓ ｓａｍｐｌｅ自动进样器），Ａｌｌｔｅｅｈ ＥＩ ＳＤ２０００ 蒸发光散射检测器，Ｂｒｅｅｚｅ色谱工作站，ＮｅｘＰｕｒｅ ＵＰｌＯＯ０ 纯水仪。 １．２ 试剂 蔗糖对照品由中国药品生物制品检定所提供 （批号１１１５０７—２００００１），乙腈（色谱纯），水（纯化水）。 ２方法与结果 ２．１色谱条件色谱柱；Ｋｒｏｍａｓｉｌ ＮＨ（５ ｂｔｍ，２５０ ｍｍ× ４．６ ｍｍ）。流动相：乙腈水（７０：３０），流速：１．２ ｍｌ／ｍｉｎ，柱 温：２５℃。氮气流速：２．５ Ｌ／ｍｉｎ，检测器温度；９Ｏ℃。 ２．２线性关系考察取蔗糖对照品约７５ ｒｎｇ，精密称定，置 １００ ｍｌ容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取２、 ５、１０、１５和２Ｏ ｍＩ，分别置２５ ｍ１量瓶中，加水稀释至刻度，摇 匀，精密量取ｌ０”１注入液相色谱仪，依照文献［２］的方法测 定，记录峰面积，以５次测定的峰面积作线性回归。结果为Ａ 一６．５２６×１０。Ｃ＋１６．６３，ｒ一０．９９９ ６。表明浓度在６Ｏ～６００ ￣ｇ／ｍｌ范围内，峰面积与测定浓度呈良好的线性关系。 ２．３最低检测限在选定的色谱条件下，按信噪比为１：３ 确定最低检测限，结果表明最低检测限为５９．６５ ｎｇ。 ２．４蔗糖含量测定 样品前处理：取样品适量（约６ ｇ）研 细，精密称定，加水约７Ｏ ｍ１溶解，摇匀，加ｌＯ ｍ１碱性酒石酸 铜甲液［称取３４．６３９ ｇ硫酸铜（ＣｕＳ（） ・５ＨｚＯ），加适量水溶 解，加０．５ ｍｌ硫酸，再加水稀释至５００ ｍｌ，摇匀］及４ ｍ１ ＮａＯＨ（１．０ ｍｏｌ／Ｌ），加水至刻度，摇匀，静置２０ ｍｉｎ，４ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，取上清液备用 ］。精密量取上述上清液 ｌＯ ｍ１，置于５Ｏ ｍ１量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取 ｌ０”１注入液相色谱仪，依照文献［２］方法测定，记录峰面积 （图ｉ、图２），按标准曲线计算样品蔗糖含量。 ７．Ｏ０ ８．Ｏ０ ９ Ｏ０ １０．Ｏ０ １１ Ｏ０ １２．Ｏ０ １３ Ｏ０ Ｍｉｎｕｔｅｓ 图１供试品色谱图 ７．Ｏ０ ８．Ｏ０ ９．Ｏ０ １０ Ｏ０ １１ Ｏ０ １２．Ｏ０ １３ Ｏ０ Ｍｉｎｕｔｅｓ 图２对照品色谱图 ２．５加样回收率试验精密称取已知含量的样品９份，照含 测项下处理后，精密量取上清液２．５ ｍｌ，置２５ ｍ１量瓶中，分 别加入不同体积的对照品溶液，制成高、中、低３个浓度（以 低浓度为１０Ｏ 计，中浓度和高浓度分别相当于低浓度的 ２００ 和３００ Ａ），０每个浓度３份，加水稀释到刻度，摇匀，照 含量测定方法测定，记录峰面积，测得蔗糖同收率分别为 ９４．０ 、９４．７ 、９６．７ ，ＲＳＤ分别为０．５ 、０．５ 、０．７ 。 ２．６重复性试验取蔗糖对照品溶液，连续进样６次。以 蔗糖峰面积计算，得ＲＳＤ＝１．０ （ 一６）。 ３讨论 ３．１ 色谱条件的选择＿４ 检测器的参数主要有漂移管温度 和载气流速，设定原则是力求得到高信噪比的结果，以推荐 值为起点，逐渐改变漂移管温度或载气流速，观察基线噪音 的大小。结果发现，温度为９Ｏ℃、流速为２．５ Ｌ／ｒａｉｎ时，噪音 最小，此时信号最强，故确定此条件为测定用条件。 ３．２测定方法的选择 目前测定中药浸膏中糖含量的方法 报道较少。糖类物质的含蕈测定通常采用高效液相色谱 （ＨＰＩ Ｃ）连接示差折光检测器（ＲＩＤ）的方法，但其灵敏度不 够，不能测出样品中的较低蔗糖茸。而蒸发光散射检测器 （ＥＬＳＤ）灵敏度远远高于示差折光检测器，凡使用的样品很 少，对糖的分离效果很好。因此，本研究对甘草浸膏样品进 行Ｊ，简单的前处理后，采用ＨＰＬＣ—Ｅ１ ＳＤ法建立了蔗糖浸膏 中蔗糖的测定方法。使用该法，蔗糖和葡萄糖可得到很好得 分离，同样该法可用于单、双糖的测定。 参考文献： ［１］王明娟，胡昌勤。金少鸿．采用ＨＰＬ＠ＥＩ ＳＤ法分析小诺霉素 及有关物质［Ｊ］．药物分析杂志，２００２。２２（３）：２０５． ［２］孙毓庆．分析化学［Ｍ］．第４版．北京；人民卫生出版社，１９８６． ２９６． ［３］梁乾德，马百平，王升启．液相色谱／蒸发光散射测定四物汤煎 液中单糖和双糖的含量【＿Ｊ］．中草药，２００４，３５（４）：３９５． Ｅ４］ 田南卉，杨国红，方颖，等．高效液相色谱法蒸发光散射检测器 测定黄芪和制剂中黄芪甲苷的含量［Ｊ］．药物分析杂志，２０００， ２ｏ（３）：１９９． ｒ收稿日期：２００５ ０４ １１］
