ABO血型系统诊断新生儿溶血病的实验研究_詹影影

【临床检验】

ABO血型系统诊断新生儿溶血病的实验研究

詹影影

(浙江省嘉兴市中心血站,浙江嘉兴　314000)

[摘要]　目的:本文通过实验观察拟了解母婴ABO血型不合的新生儿溶血病(HDN)的血清学检测结果。方法:选取市本级医院送我站320例有不同程度黄染或临床疑似为新生儿溶血病的新生儿进行了血清学检测。母婴血型鉴定包括新

生儿溶血病三项试验,即直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验。结果:新生儿溶血病检测阳性占送检标本的71.3%(228/320)。其中出生后0d～2d组的送检阳性率为.2%,出生后3d～4d组的送检阳性率为71.0%,出生后5d～7d组的送检阳性率为46.9%,出生后8d～15d组的送检阳性率为25.4%。结论:血型血清学检验是早期诊断新生儿溶血病的准确方法。抗体释放试验阳性患儿血液中存在的游离抗体有助于判断患儿疾病的发展趋势。[关键词]　ABO血型系统;新生儿溶血病[中图分类号]　R446　　　　[文献标识码]　B　　　　[文章编号]　1004-8685(2010)06-1421-02

ABObloodgroupsystemdiagnosisofneonatalhemolyticdiseaseofexperimentalstudy

ZHANYing-ying(JiaxingCentralBloodStation,Jiaxing314000,China)

[Abstract]　Objective:Inthisstudy,theexperimentalobservationofmaternalandchildtounderstandtheABOhemolyticdis-easeofthenewborn(HDN),aswellastheincidenceofHDNserologicaltestresults.Methods:210casesinourhospitaltherearedifferentlevelsorclinicalsuspectedyellowdyeforhemolyticdiseaseofnewbornbabieshadaserologicaltesting.Identificationofmaternalandchildbloodgroupincludedthreetrialsofneonatalhemolyticdisease,thatis,directantiglobulintest,freeanti-bodytest,antibodytestrelease.Results:Theincidenceofhemolyticdiseaseofnewbornwas53.1%(109/212).One0-2dafterbirthgroupwas.2%positiverate,3-4dafterbirth,thepositiverateofgroup71.0%,5-7dafterbirth,thepositiverateofgroup46.9%,8-15dafterbirth,thepositiverateofgroup25.4%.Conclusion:Thebloodgroupserologytestingforearlydiag-nosisofneonatalhemolyticdiseaseoftheexactmethod.Positiveantibodytestinchildrenwiththereleaseoftheexistenceofthebloodoffreeantibodiesinchildrenwiththediseasewillhelptodeterminetrends.[Keywords]　ABObloodgroupsystem;HDN　　新生儿溶血病(HDN)是发生在胎儿和早期新生儿的一种免疫溶血性疾病,是由于母婴血型不合而引起的同族血型免疫性疾病,可发于胎儿或新生儿早期,在我国Rh(-)人群约占总人群的0.04%[1]。新生儿溶血病以ABO血型系统引起多见,Rh血型系统引起少见。早期诊断新生儿溶血病,对预防患儿发生高胆红素血症具有重要的临床意义[2]。近年来,我站对因血清证据诊断为ABO血型系统引起的320例新生儿溶血病患儿进行回顾性分析,现将结果报告如下。1　资料与方法1.1　一般临床资料

选取对象为2006年6月-2009年6月市本级医院送我站320例有不同程度黄染或临床疑似为新生儿溶血病的新生儿进行了血清学检测。年龄0～15天,平均7.9天;所有对象均于换血前采样送检。母亲血型为“O”型、新生儿血型为A

[作者简介]　詹影影(1969-),女,本科,主治医师,主要从事采

供血工作。

型的有124例(占54.4%)、B型有104例(占45.6%),共计228例。所有患儿无巨细胞病毒抗体、单纯疱疹病毒抗体、风

疹病毒抗体、弓形虫抗体(TORCH)感染、无地中海贫血及葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)检验正常。新生儿溶血病临床诊断标准为[3]:①母子血型不合;②抗体释放试验或直接抗人球蛋白试验阳性;③发生高胆红素血症的为临床型,否则为亚临床型。

1.2　实验方法

首先抽取母亲EDTA-K抗凝血5ml;父亲EDTA-K22抗凝血1ml;抽取患儿EDTA-K抗凝血2ml,未抗凝血23ml。所有标本均于48h内检测完毕。试剂采用自制的A、B、O标准红细胞;上海华泰制药有限公司提供的抗A、抗B标准血清;仪器采用上海精宏设备有限公司DKB-8A型37℃恒温孵育箱;长春博德BYL型血型血清学多用离心机。参照全国临床检验操作规程,血型鉴定:婴儿ABO血型:试管法正定型。父母亲ABO血型:试管法正反定型。Rh(D)血型:试管法。直接抗人球蛋白(DAT)试验:将患儿RBC用生理盐水洗涤3次,配成2%红细胞悬液,吸取1滴后加抗人球蛋白试剂2

1422中国卫生检验杂志2010年6月第20卷第6期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Jun2010;Vol20　No6

滴,3000r/min离心15s。游离抗体试验:3个试管分别标注Ac、Bc、Oc,相应试管加入患儿血清各2滴,在对应试管中分别

加入标准A细胞、B细胞和O细胞,放入37℃水浴箱孵育30min后拿出筛选,3000r/min离心1min,共3次,最后一次扣干,加入抗人球蛋白试剂,3000r/min离心15s。抗体释放试验:将患儿红细胞洗涤后加入等量生理盐水,置56℃水浴箱中加热放散10min,以3000r/min离心1min,取上清放散液分成三份于3个标有Ac、Bc、Oc小试管中,分别加入相应的酶处理的Ac、Bc、Oc各1滴,置37℃水浴箱30min,用生理盐水洗涤3次,最后在各管中加1～2滴抗人球蛋白试剂,以3000r/min离心15s。DAT试验以出现凝集为阳性,游离和释放试验均以检出可和新生儿红细胞反应的抗体为阳性。DAT试验、游离和释放试验均为阳性,判定为HDN阳性;单项释放试验阳性及DAT或释放试验阳性游离试验阴性的结果也可判定为HDN阳性;DAT或游离试验单项阳性只能判定为HDN可疑阳性。1.3　统计学方法

采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析,分类资料统计

2

分析采用χ检验,P<0.05表示两组差异具有统计学意义。2　结果

2.1　新生儿溶血病不同年龄组发病率

观察实验结果显示,本组320例新生儿溶血病样本中,新生儿溶血病的阳性率为71.3%(228/320)。其中出生后0d～2d63例,阳性率为27.6%(63/228),出生后3d～4d组106例,阳性率为46.5%(106/228),出生后5d～7d组47例,阳性率为20.6%(47/228),出生后8d～15d组12例,阳性率为

25.3%(12/228)。经χ检验分析,出生后0d～2d组、3d～4d组、5d～7d组、8d～15d组之间均有显著性差异(P<0.05)。

致新生儿溶血病(HDN)的发病率一直高居不下。HDN的最大危害是引起新生儿体内红细胞溶解、破坏,间接胆红素增

高,严重者可导致胆红素脑病,引起智力与运动障碍。因此早期检测、早期诊断、早期治疗,对提高新生儿健康水平,避免并发症的发生,具有重要意义。

ABO溶血病是同种免疫性疾病,母体受到胎儿红细胞抗原的刺激而发生同种免疫反应,产生对应于胎儿红细胞抗原的IgG血型抗体,该IgG血型抗体通过胎盘到达胎儿体内,在胎儿体内与胎儿红细胞上的对应抗原结合,通过补体的参与,使胎儿红细胞受损,以至出现新生儿ABO溶血病[5]。本研究在320例新生儿溶血病的检测结果中观察到ABOHDN的检测阳性率达71.3%,可见其发病率较高。对此临床医务工作者应予重视。从中我们还观察到患儿出生后的时间与HDN的检出率有很大关系。患儿出生时间越短检测阳性率越高。出生0d～4d检测阳性率最高,这是因为在发病24h内抽样检测,新生儿血液中还有较多的游离IgG血型抗体及致敏红细胞存在的缘故,在发病24h后随着发病时间的延长,检测率越来越低,这是由于新生儿血液中只有少量的游离IgG血型抗体及致敏红细胞存在,而大部分IgG血型抗体以游离的抗原抗体复合物的形式存在,失去了反应原性。故临床应尽量早发现、早检测、早确诊、早预防、早治疗,以减少核黄疸的发生。ABO系统引起的新生儿溶血病,多发生于O型母亲和A型或B型的婴儿,由于O型母亲血清中含有免疫性的抗A或抗B,这些抗体为7s-r球蛋白(IgG)。此种球蛋白能通过胎盘引起ABO新生儿溶血病。O型母亲血清中IgG抗A(B)效价较A型血清中的抗B和B型血清中的抗A为高,所以ABO溶血患儿的母亲往往多数是O型。据文献报道[6]ABOHDN的发病与其母亲体内的IgG抗A(B)效价高低成正相关,即母亲IgG抗A(B)效价越高,ABO新生儿溶血病的发病率越高。故产前检测夫妇ABO血型不合,孕期应定期对孕妇进行IgG抗A(B)效价的检测,这对预防和早期诊断、治疗ABO新生儿溶血病有积极意义。

[参考文献]

[1]陈平,唐安洲,孙华,等.新生儿高胆红素血症199例听损伤特征

2.2　患儿HDN血清学检测结果

母婴ABO血型不合HDN检测阳性标本320例中,三项试验均为阳性68例(32.3%),两项试验阳性81例(38.6%),一项试验阳性59例(28.0%),见表1。

表1　患儿HDN血清学检测结果(例)

血型A型B型

总阳性124104

三项阳性

6547

二项阳性

2125

一项阳性

3832

分析[J].中国实用儿科杂志,2005,20(2):107-109.

[2]宋鹏,罗凌惠,,等.急性高胆红素血症豚鼠听功能研究[J].

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[4]何小云.大剂量丙种球蛋白治疗新生儿ABO溶血病的临床研究

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[5]杨彩云,吴明昌,王慧欣,等.静脉注射不同剂量丙种球蛋白治疗

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测结果分析与新生儿溶血病的防治[J].中国妇幼保健,2006,21(19):2706-2707.

(收稿日期:2010-03-23)

3　讨论

新生儿ABO溶血病是由于母婴血型不合,母体产生的抗胎儿红细胞抗原的免疫抗体IgG经过胎盘进入胎儿血液循环,并与其红细胞上相应抗原结合,使红细胞在单核一吞噬细胞系统内被破坏,引起血管外溶血。新生儿ABO溶血病是引起新生儿高胆红素血症的常见原因,可致脑干听觉传导通路损害和高胆红素脑病,严重者危及患儿生命,影响其生存质量[4]。在新生儿黄疸和高胆红素血症病因中,母婴血型不合