复习题
一、名词解释
发酵工程：采用现代工程技术手段, 利用微生物的某些特定功能, 为人类生产有用的产品的一种新技术。
诱变育种：利用诱变剂处理微生物细胞，提高基因突变频率，再通过适当的筛选方法获得所需高产优质菌种的方法。
代谢控制发酵：是指利用生物的、物理的、化学的方法，人为的改变微生物的代谢途径，使之合成、积累、分泌我们所需要的产品的过程。
杂交育种：人为地利用原核微生物中的接合、转化、转导及真核微生物的有性生殖或准性生殖等过程，使两个具有不同遗传性状的菌株发生基因重组，以获得性能优良的生产菌株。 实罐灭菌（实消）：分批灭菌是将配制好的培养基放入发酵罐中，通入蒸汽，使培养基和所有设备一起灭菌。这一过程也称为实罐灭菌（实消）。
寡核苷酸介导诱变(oligonucleotide-directed mutagenesis):指在DNA水平上改变氨基酸的编码序列，也称定点诱变(site-specific mutagenesis); 二、填空题
1.1943年，青霉菌产生青霉素只有20单位/mL。后来，科学家用X射线、紫外线等射线照射青霉菌，结果，绝大部分菌株都死亡了，只有极少数菌株生存下来。在这些生存下来的菌株中，有的菌株产生青霉素的能力提高了几十倍（目前青霉素产量已经达到 2 000单位/mL）。请回答：
（1）用射线照射青霉菌，能培育出青霉素高产菌株。这是由于射线使青霉菌发生了__基因突变____的缘故。
（2）发生以上变化的化学成分，其基本组成单位是__脱氧核糖核苷酸____，发生以上变化的时期是__间期____。
（3）经射线处理后，在存活的青霉菌中，培育出了青霉素高产菌株。在这一过程中，起选择作用的因素是__射线____。
（4）用射线照射，培育出生物新性状的育种方式叫做__诱变育种____。它和基因工程、细胞工程在改变生物遗传特性上的不同点是____基因工程、细胞工程能定向改变生物的遗传特性，诱变育种改变生物的遗传特性是不定向的______。
2.发酵工程中育种方法的方法有__诱变育种_，_杂交育种_、_原生质体融合、基因工程技术______。
3.发酵生产中的培养基类型有斜面培养基 (孢子培养基)、种子培养基、发酵培养基。
对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是 致病 ，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
4.通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，共价结合法，交联法。 5.抗体酶的制备方法有拷贝法、引入法和诱导法。
6.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km减小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。
7.菌种培养一般采用的方法有液体培养法和固体培养法。
8.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度，pH，氧气，泡沫，二氧化碳和培养基浓度等。
9.、将10 mL酵母菌液放在适宜的温度下培养，并于不同时间内等量均匀取样4次，分别测定样品中的酵母菌的数量和pH，结果如下表。请分析回答：
样品 1 2 3 酵母菌的数量（个/立方毫米） 1 210 820 1 210 pH 4.8 5.4 3.7 5.0 4 1 000 （1）表中样品的取样先后次序为___2、4、1、3___。 （2）若第5次均匀取样时，样品中的酵母菌数量为760个/立方毫米，产生这一结果的原因是____营养物质不断被消耗，导致部分酵母菌因缺营养而死亡_________。 10.蛋白质工程中最常用的技术__定点诱变_______。 三、选择题
1.蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是
A． 氨基酸结构 B．蛋白质空间结构 C．肽链结构 D．基因结构 2.下列关于蛋白质工程的说法错误的是
A．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类的需要
B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构 C．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 D．蛋白质工程与基因工程密不可分，又被称为第二代基因工程 3.蛋白质工程的基本流程正确的是
错误！未找到引用源。蛋白质分子结构设计错误！未找到引用源。DNA合成错误！未找到引用源。预期蛋白质功能错误！未找到引用源。根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列 A．错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。 B．错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。 C．错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。 D．错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。错误！未找到引用源。
4.基因工程和蛋白质工程的区别
A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作
B．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质 C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平） D．基因工程完全不同于蛋白质工程 5.以下不属于发酵工程范畴的是
A.利用需氧型青霉菌生产青霉素 C.利用酵母菌的无氧呼吸获得酒精 A.降低温度 C.加缓冲液
B.缺氧时人的某些细胞产生乳酸 D.利用乳酸菌制作泡菜 B.隔绝空气
D.加新鲜培养基
6.酒厂利用酵母菌酿酒过程中，经检测活菌数量适宜却不产生酒精，应采取的措施是
7.温度对发酵过程的影响，不正确的是
A.温度过高，发酵周期缩短，产量降低
B.温度不影响生物合成的途径
C.温度能影响菌种对营养物质的吸收
D.菌体生长和产物合成所需的最适温度不一定相同 四、问答题
1.发酵工业对菌种的要求有哪些？
a.生长快、发酵周期短，表达的目的产物产量高，不产生或少产生副产物； b.纯净健壮，不易退化，产量稳定，不易被他种微生物污染； c.对诱变剂敏感；
d.能在廉价培养基上迅速生长；
e.目的产物最好能分泌到细胞外。
2.杂菌的危害有哪些？
a.杂菌会消耗生物反应的基质或产物，造成生产能力的下降。
b.杂菌也会产生代谢产物，这就使产物的提取更加困难，造成得率降低，产品质量下降。 c.杂菌大量繁殖后，会改变反应液的pH值，使反应异常。 d.如发生噬菌体污染，菌种细胞将被裂解，使生产失败。 3.种子必须具备的条件有哪些？
a.细胞的活力强，接种后在发酵罐中能迅速生长 b.菌体总量和浓度能满足大容量发酵罐的要求 c.无杂菌污染（不带杂菌） d.生产能力稳定
4.按照发酵产物的范围分为几类？ （1）以微生物细胞为产物的发酵
（2）以微生物代谢产物为产品的发酵 （3）以微生物酶为产品的发酵 （4）生物转化或修饰化合物的发酵 （5）微生物废水处理和其他
5.发酵生产泡沫产生的原因和泡沫的危害有哪些？消泡措施有哪些？
A.产生泡沫的原因： 通气和机械搅拌；
培养基中某些发泡物质(如蛋白胨、玉米浆、酵母粉等)产生。
糖类物质本身起泡能力差，但较高浓度的糖增加了培养基的黏度，有利于泡沫的稳定。 微生物的代谢活动所产生的气体； B.泡沫的危害：
影响微生物对氧的吸收； 妨碍二氧化碳的排除；
降低了发酵罐的装料系数，影响设备的利用率。 有可能引起跑料，增加染菌机会。
C.消泡措施：
物理消泡法：靠机械的运动或压力的变化使泡沫破碎，最简单的是在发酵罐的搅拌轴上部安装消泡桨，当消泡桨随搅拌轴转动时将泡沫打碎。
化学消泡法：各种天然的动植物油及来自石油化工生产的矿物油、表面活性剂等。如泡敌（聚醚类）
6.蛋白质工程的一般步骤是什么？ a.分离纯化需改造的目的蛋白；
b.氨基酸序列测定、X射线晶体衍射分析、核磁共振分析等，更多地获取蛋白质结构与功能的数据；
c.设计核酸引物或探针，从cDNA文库或核基因文库中获取编码该蛋白质的基因序列； d.设计改造方案；
e.对基因序列进行改造；
f.构建表达载体，并促使表达；
g.分离纯化表达产物并对其功能进行检测。
