细菌复苏与冻存方法
复苏：
1. 无菌操作台灭菌30min后，75%酒精棉球消毒包括手在内的所有物品，
2. 用灭菌接种环蘸取一环菌液放入3ml LB培养基中，于37℃ 150rpm过夜培养；
3. 将过夜菌液重新按照步骤2活化一次
4. 活化2次后的菌液即可用于实验
冻存：
1. 将活化2次后的菌液重新接种于5mlLB培养基中，于37℃ 150rpm过夜培养；
2. 取800ul菌液放入1.5ml离心管中，加入灭菌甘油（终浓度为10%）。混匀后，用封口膜封好，-70℃和-20℃冰箱冻存。至少冻存3管。
建议在细菌复苏后就冻存3-5管细菌，防止实验过程中细菌污染。
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