高功率雷达微波辐照对大鼠肝功能的影响

束，眶后静脉丛取血，检测血清ALT、AST、总胆红素(TBil)、总胆红素(ChE),白蛋白(Alb)。断颈处死，迅速分离肝

组织,采用免疫组织SP法检测骨桥蛋白(OPN)表达。结果 微波辐照组和CCl4肝损伤组血清ALT、AST、TBil水

平均明显高于阴性对照组，血清ChE、Alb水平均明显低于阴性对照组(P均＜0.05);而微波辐照组与CCl4肝损伤 组上述指标比较P均＞0. 05o微波辐照组、CCl4肝损伤组肝组织OPN阳性表达只数均明显高于阴性对照组(P均

＜0.05)，而微波辐照组与CCl4肝损伤组比较P均＞0. 05。结论 高功率雷达微波辐照可导致大鼠一定程度肝功

损。关键词:肝损伤;微波辐照;肝功能;骨桥蛋白;免疫组化doi ： 10. 3969/j. issn. 1002-266X. 2019.19. 010中图分类号:R575.3 文献标志码:A 文章编号：1002-266X(2019)19_0039-03Effect of microwave radiation with high power on liver function of ratsWANG Honghong1, ZHANG Yongguo, TIAN JiyuZHANG Jun, ZENG Jun(1 No. 518 Hospital of PLA, Xi'an 710043 , China )Abstract： Objective To investigate the effect of microwave radiation with high power on the liver functions of rats. Methods Twenty-four male SD rats were selected and divided into three groups randomly，with 8 rats in each group. The

, rats in the microwave radiation group were irradiated by microwave with high power. The rats in the CCL4 liver injury group

were injected with 60% CCJ olive oil solution into abdomen subcutaneously by 0. 3 mL/100 g body mass. The negative

control group was placed in the same position as the microwave irradiation group，without microwave radiation. After the es­tablishment of animal models，blood was collected from posterior orbital venous plexus. Then，the serum alanine amin­

otransferase (ALT) , aspartate aminotransferase ( AST) , total bilirubin (TBil) , total bilirubin ( ChE) , and albumin

( Alb) were detected. The rats were killed，and the liver tissues were separated quickly. The positive expression of os-

teopontin ( OPN) was detected by immunohistochemical SP method. Results The levels of serum ALT，AST and TBil in

the microwave radiation group and CCl4 liver injury group were significantly higher than those in the negative control group，

and the levels of serum ChE and Alb were significantly lower than those in the negative control group ( all P < 0. 05) . There was no significant difference between the microwave radiation group and CCl4 liver injury group ( P > 0. 05) . The positive

expression of OPN in the liver tissues of microwave radiation group and CCl4 liver injury group was significantly higher than

that of the negative control group ( P < 0. 05 ) . No significant difference was found in the expression of OPN between the microwave radiation group and CCl4 liver injury group ( P >0.05). Conclusion Microwave radiation with high power can

cause the liver function injury in rats to some degree.Key words： liver injury； microwave radiation； liver function； osteopontin； immunohistochemisty随着电磁波技术在通讯,医疗、军事等领域广泛 应用,人类生活环境中充斥着电磁波,但人们对电磁 波辐射危害的认识却相对不足⑴。近年研究发现,基金项目：国家自然科学基金资助项目(81301686)长期暴露于微波辐照下，可导致视力、听力、嗅觉等

感觉器官功能下降，还可导致循环、生殖等系统损 害⑷。肝脏是人体重要的消化器官,其慢性损伤可

39山东医药2019年第59卷第19期引起肝纤维化，并逐渐发展为肝硬化甚至肝癌。有 研究发现，除病毒感染、酒精、工业毒物或药物 等［3,］可导致肝损伤外,微波辐照亦可能是导致肝

采用全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、总胆红 素（TBil）、总胆红素（ChE）,白蛋白（Alb） °1.4肝组织OPN表达检测 采用免疫组化SP法。

损伤的重要原因,但目前鲜见相关报道° 2014年1 各组眶后静脉丛取血后，断颈处死,迅速分离肝组

织,4%甲醛固定，常规梯度乙醇脱水、石蜡包埋,5 ^m厚连续切片。切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水

月-2016年12月，本研究观察了高功率雷达微波

辐照对大鼠肝功能的影响。现报告如下。1材料与方法1.1材料 成年雄性SD大鼠24只，清洁级，鼠龄 6-8周，体质量220 -240 g,购自空军军医大学实

化；%比。2室温孵育20 min,以消除内源性过氧

化物酶活性;加入4%正常山羊血清封闭，置于预先

在37 C中平衡30 min湿盒,7 C孵育20 min;倾去

验动物中心，动物许可证号:SCXK（京）2011-005° 所有大鼠单笼饲养，自由摄食、饮水，饲养环境温度 18 -22 C，相对湿度40% -70%，光照12 h明暗交

血清，滴加鼠抗人OPN —抗,4 C孵育过夜;次日，

加入生物素标记的羊抗鼠IgG多克隆抗体,湿盒中

37 C孵育30 min；滴加SP工作液,7 C孵育30 min;DAB显色，显微镜下控制显色时间，自来水反

替。高功率雷达微波源，由某测控站提供。全

自动生化分析仪，美国贝克曼库尔特公司。免疫组 化试剂盒、DAB显色试剂盒,北京中山生物技术有

复冲洗终止反应;苏木素复染,梯度乙醇脱水、二甲

苯透明，中性树胶封片，显微镜下观察。采用双盲法

由两位病理科医师阅片。OPN阳性染色定位 于细胞质中，呈棕褐色颗粒。每张切片随机选取5

限公司°鼠抗人骨桥蛋白（OPN）抗体，美国Chemi­

con 公司;生物素标记的羊抗鼠IgG多克隆抗体，北

京 物 术有 °个200倍视野，评估每视野着色强度；每视野计数

200个细胞,计算阳性细胞比例。着色强度评分:无

1.2动物分组与模型制备 所有SD大鼠适应性

喂养1周，随机分为微波辐照组、CCl肝损伤组、阴

4着色为0分，淡棕色为1分,棕色为2分，深棕色为3 分;阳性细胞比例评分：<1%为0分,1% - <25%

为 1 分,25% - <50% 为 2 分,50% - <75% 为 3 分，M75%为4分。着色强度评分和阳性细胞比例

性对照组，每组8只。微波辐照组置于塑料盒中,用

吊车升至与雷达天线主轴等高，距离地面50 m；辐

照参数:最高功率15 kW,峰值功率为1.210 3 kW, 平均功率8 kW,辐照30 min,休息15 min,每天累计 辐照2 h,连续辐照5 d° CCl4肝损伤组给予60% CCl4橄榄油溶液0. 3 mL/100 g体质量腹部皮下注

评分乘积>1为OPN阳性表达。1.5统计学方法 采用SPSS17.0统计软件。计量

资料以X ± 5表示，多组间比较采用单因素方差分

析，组间两两比较采用LSD-t检验。计数资料比较

射，每隔3 d注射一次，连续注射16周。阴性对照

组置于塑料盒中，用吊车升至与微波辐照组同等位， 微 照°1.3肝功能检测 各组建模结束，眶后静脉丛取血1.5 mL, 3 500 r/min离心10 min,留取上层血清。表1组别阴性对照组CCl4肝损伤组nALT(U/L)采用确切概率检验° P <0. 05为差异有统计学 意义。2 结果2.1各组肝功能比较 见表1°TBil( pimol/L)ChE ( pmol/L)各组肝功能比较（珔± S）Alb(g/L)AST(U/L)88856. ± 5.13402. ±25.36 *113.24±13.255.67 ±0.5815.44±0.96 *1.38 ±0.350.97±0.27*1.02±0.16*39.15 ±1.24.98 ±1.83 *23.55 ±1.24*395.65 ±19.85 *420.65 ±23.55 *微波辐照组380. ±20.13 *12.28 ±0.87 *注:与阴性对照组比较，* P <0.052.2各组肝组织OPN阳性表达比较 微波辐照组 进步，已在通讯、交通,医疗等领域广泛应用，给人们

的日常生活和工作带来诸多便利。早在20世纪40

有1只因操作失误导致免疫组化染色失败,OPN阳 性表达5只,CCL肝损伤组与阴性对照组OPN阳性

表达分别为6、1例。CCl4肝损伤组和微波辐照组 OPN阳性表达只数均明显高于阴性对照组（P均< 0.05、，而微波辐照组与CCl4肝损伤组比较P >

年代，人们就注意到微波辐射可对生殖系统造成损 伤®句，但未引起广泛关注。近年随着工业的发展和

医学的进步,人们发现微波辐射对生物体存在一定致

伤作用，并逐渐引起关注。目前认为,微波辐射可引 起大脑、心肌等器官损伤，对大脑的损伤主要表现为

0. 05°3讨论微波技术最初用于军事领域，随着科技的不断 40出现神经衰弱、学习和记忆力减退等不良症状，对心

肌的损伤主要表现为心肌细胞结构、功能和表型改

山东医药2019年第59卷第19期变。有研究发现，微波辐照还可引起血液、生殖等系 统损害，其对血液系统的损害表现为外周血白细胞、 红细胞计数下降以及血红蛋白含量降低，对免疫系统 的损害表现为血清IgM、IgA抗体水平改变［7,8］。但目

损。综上所述,高功率雷达微波辐照可导致大鼠一

定程度肝功能损伤。参考文献前鲜见微波辐照对肝功能影响的报道。肝脏是人体的重要消化器官，具有代谢、解毒、

[1 ] Michael B, Grace S, Vanier J, et al. Collins. Scale-up of the

green synthesis of azacycloalkanes and isoindolines under micro­

：胆汁分泌、免疫防御等生物学功能。肝功能损害在 临床上较为常见，其常见病因为病毒感染、代谢障

wave irradiation [ J . Org Process Res Dev20060 (6 ) : 1233-

], ,[2Franchini VRegalbuto EDe Amicis Aet al. Genotoxic effects

in human fibroblasts exposed to microwave radiation J. Health

]

1237., , , 碍、营养不良等，但仍有部分肝功能损伤的原因未能 [ ] 明确。近年研究认为,环境污染可能是导致不明原

因肝功能损伤的重要原因\"10］。而微波是一种看不

见的环境污染物，在高强度或长时间辐照下可能会 给机体健康带来不利影响。已有研究证实,微波辐 照可通过影响抗氧化作用导致大鼠肝功能损 伤「11,2］。但正常人群长期暴露于高功率雷达微波

辐照环境中是否亦能导致肝功能损伤，尚不清楚。ALT和AST统称为氨基酸转移酶，主要存在于 肝细胞中，正常情况下血清含量很低。但当肝细胞

受损时，肝细胞膜通透性增加，胞质内alt,AST可

释放入血液,故血清ALT .AST水平升高可提示肝功

损。 红 谢 具有重要作用。 TBil是直接胆红素和间接胆红素的总和，当肝细胞受损

时可引起胆红素代谢障碍，继而胆红素在血液中蓄 积,最终导致血清TBil水平明显升高。ChE是肝脏

储备功能的一个重要标志，可用于评估肝实质细胞

损害〔13］。Alb由肝脏合成，是正常人体血清总蛋白 中的主要蛋白质成分，可反映肝脏合成、代谢和储备 功能，也是评估肝功能损伤的一个重要指标。CCl4

肝损伤模型是一种经典的动物研究模型，可重复性

好酗］。因此，本研究以CCl4肝损伤模型作为阳性

对照。结果发现,微波辐照组和CCl4肝损伤组血清 ALT、AST、TBil水平均明显高于阴性对照组，血清 ChE、Alb水平均明显低于阴性对照组;而微波辐照

组与CCl4肝损伤组上述指标比较差异均无统计学

意义。结果提示高功率雷达微波辐照能够引起大鼠

损。OPN是一种分泌型磷酸化糖蛋白，可由多种组

织细胞合成与分泌，如骨、肾、肌肉等,能够参与组织

修复、重建等病理过程「15］。正常肝组织OPN表达

较少，但在肝炎、肝纤维化等组织中OPN表达明显 升高。 因此, OPN

个反 损 的标。本研究结果显示，微波辐照组,CCl4肝损伤组 肝组织OPN阳性表达只数均明显高于阴性对照组， 而微波辐照组与CCl4肝损伤组比较差异无统计学 意义。进一步证实高功率雷达微波辐照可导致大鼠[3 ] Phys, 2018,115(1) ：126-139.Hassan A, Fontana RJ. The diagnosis and management， of idiosyn­

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